Replicaci N 10
Replicación
Víctor Hugo Casco
2010
“Labor Improbus Omnia Vincit”
(El Trabajo Tenaz Todo lo Puede)
La reacción del ADN es catalizada por la
ADN polimerasa
li
Hebra cebadora Hebra patrónDirección de crecimiento de laa cadena
Dirección dee crecimiento de la cadena
Hebra cebadora Hebra patrón
Termodinámica de la polimerización
catálisis
cebador
∆G= -3,5 Kcal/mol
Apareamiento debases
molde
Pirofosfatasa
∆G= -7 Kcal/mol
Substratos requeridos para la síntesis
de ADN
cebador annealed
Extremo creciente del ADN
Hebra molde
ADN de hebra doble
ADN de hebra simple
Replicaciónθ (Theta)
Hebra hija
Horquilla de replicación
Horquilla de replicación
Hebra parental
(From J. Cairns, 1963. Cold Spring Harbor Symp. Quant. Biol. 28: 43.)
oriC de E.
E coli
TeiscaidecámerosNonámeros
Cromosomas eucarióticos
ori
ori
ori
Iniciación de la replicación
ADN recién sintetizado
Modelo de iniciación de la replicación
en ell oriC
iC de
d Escherichia
E h i hi colili
La ADNPolimerasa y la replicación
El correcto apareamiento de bases es requerido por
l catálisis
la
táli i dde nts.
t por lla ADN polimerasa
li
a) Apareamiento correcto
b) Apareamiento incorrecto
moldebases
no apareadas
cebador
ADN polimerasa
Impedimentos estéricos para la
utilización de rNTP
molde
Aminoácido
discriminador
cebador
ADN polimerasa
Estructura tridimensional de la ADNpolimerasa
Pulgar
Dedos
Pulgar
Dedos
ADN
Palma
molde
Palma (hoja plegada β)
cebador
ADN polimerasa del T7
2+
Mg
Los iones de
o
estabilizan la
polimerización de la hebra
Ión metálico A
Ión metálico B2+
Zn
La ADN polimerasa soporta el nt.
entrante si el apareamiento es correcto
Esquema del patrón del ADN molde en
la ADN polimerasa
pulgar
dedos
Nucleótido ingresante
molde
Doblez de
la cadenamolde (~90°)
Base
molde
cebador
Procesividad de la ADN polimerasa
• Es una característica de enzimas que operan sobre
substratos poliméricos
• Se define como el promedio de nucleótidos...
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