Replicacion
Páginas: 24 (5960 palabras)
Publicado: 18 de noviembre de 2012
REPLICACIÓN DEL ADN
La replicación inicia en la burbuja de replicación.
Las propiedades fundamentales del proceso de replicación del DNA y los mecanismos utilizados por los enzimas que lo catalizan han demostrado que son básicamente idénticos en todos los organismos.
Reglas fundamentales:
1. La replicación del DNA es semiconservadora: Durante la replicación del DNA cada hebrasirve de molde para la síntesis de la cadena complementaria. El resultado son dos moléculas de DNA nuevas, cada una con una cadena nueva y una vieja. Este proceso se denomina replicación semiconservadora.
2. La replicación empieza en un punto de origen y transcurre de forma bidireccional.
Las horquillas de replicación son las zonas donde se desenrolla el DNA y las cadenas separadasse replican rápidamente.
3. La síntesis de DNA transcurre en dirección 5'��3' y es semidiscontinua: Una cadena nueva de DNA siempre se sintetiza en la dirección 5'��3'. Si las dos cadenas de DNA se sintetizasen continuamente a medida que se desplaza la horquilla de replicación, una tendría que ser sintetizada en dirección 3(5'. Lo que ocurre es que una de las cadenas de DNA sesintetiza en fragmentos cortos (fragmentos de Okazaki). Es decir una cadena se sintetiza continuamente y otra discontinuamente. La cadena continua o conductora se sintetiza en la misma dirección que el movimiento de la horquilla de replicación. La cadena discontinua o rezagada se sintetiza en dirección opuesta a la del movimiento de la horquilla.
Nucleasas
Los enzimas que hidrolizan los enlacesfosfodiester de los ácidos nucleicos se conocen como nucleasas.
Desoxiribonucleasas ó DNasas(específicas para DNA
Ribonucleasas ó RNasas(específicas para RNA
Las nucleasas también se pueden clasificar como exonucleasas y endonucleasas.
Las exonucleasas degradan los ácidos nucleicos desde un extremo de la molécula. Algunas actúan en la dirección 5'( 3'y otras en la dirección 3'—>5',eliminando nucleótidos del extremo 5'o del 3'respectivamente.
Las endonucleasas actúan en posiciones internas de la cadena, reduciéndola a fragmentos cada vez más pequeños.
ADN POLIMERASAS
La DNA polimerasa I de E. coli es un enzima con una sola cadena polipeptídica de 103 kD.
Cataliza la adición paso a paso de las unidades desoxirribonucleotídicas a la cadena de DNA:
(DNA)n +dNTP((DNA)n+1+ PPi
La DNA polimerasa I requiere los siguientes componentes para sintetizar una cadena de DNA:
1. Las cuatro clases de desoxirribonucleósidos 5'-trifosfato: dATP dGTP, dTTP y dCTP. También se requiere la presencia de Mg2+.
2. Un molde: la reacción de polimerización está dirigida por una cadena molde de DNA según las reglas de apareamiento de bases deWatson y Crick.
3. Un cebador: la DNA polimerasa une desoxirribonucleótidos a un grupo 3'-OH de una cadena preexistente. Los cebadores a menudo son cadenas de RNA en lugar de DNA. Enzimas específicos sintetizan estos cebadores donde y cuando son requeridos.
Después de añadir un nucleótido a una cadena de DNA, la DNA polimerasa se disocia o bien se traslada a lo largo del molde y añadeotro nucleótido. El número de nucleótidos añadidos antes de que la polimerasa se disocie define su procesividad.
La DNA polimerasa I también puede catalizar la hidrólisis del DNA así como su polimerización.
El enzima contiene actividad exonucleasa 3'(5'que tiene una función correctora de la polimerización.
La DNA polimerasa examina el resultado de cada adición que cataliza antes de laincorporación del siguiente nucleótido. Si se ha incorporado una base errónea (no apareante), la DNA polimerasa elimina el residuo incorrecto del extremo cebador antes de continuar con la polimerización.
Esta actividad exonucleasa 3'(5' mejora en gran medida la exactitud de la replicación del DNA. La DNA polimerasa solamente deja tras de sí un error cada 106 a 108 bases añadidas.
La DNA polimerasa I...
La replicación inicia en la burbuja de replicación.
Las propiedades fundamentales del proceso de replicación del DNA y los mecanismos utilizados por los enzimas que lo catalizan han demostrado que son básicamente idénticos en todos los organismos.
Reglas fundamentales:
1. La replicación del DNA es semiconservadora: Durante la replicación del DNA cada hebrasirve de molde para la síntesis de la cadena complementaria. El resultado son dos moléculas de DNA nuevas, cada una con una cadena nueva y una vieja. Este proceso se denomina replicación semiconservadora.
2. La replicación empieza en un punto de origen y transcurre de forma bidireccional.
Las horquillas de replicación son las zonas donde se desenrolla el DNA y las cadenas separadasse replican rápidamente.
3. La síntesis de DNA transcurre en dirección 5'��3' y es semidiscontinua: Una cadena nueva de DNA siempre se sintetiza en la dirección 5'��3'. Si las dos cadenas de DNA se sintetizasen continuamente a medida que se desplaza la horquilla de replicación, una tendría que ser sintetizada en dirección 3(5'. Lo que ocurre es que una de las cadenas de DNA sesintetiza en fragmentos cortos (fragmentos de Okazaki). Es decir una cadena se sintetiza continuamente y otra discontinuamente. La cadena continua o conductora se sintetiza en la misma dirección que el movimiento de la horquilla de replicación. La cadena discontinua o rezagada se sintetiza en dirección opuesta a la del movimiento de la horquilla.
Nucleasas
Los enzimas que hidrolizan los enlacesfosfodiester de los ácidos nucleicos se conocen como nucleasas.
Desoxiribonucleasas ó DNasas(específicas para DNA
Ribonucleasas ó RNasas(específicas para RNA
Las nucleasas también se pueden clasificar como exonucleasas y endonucleasas.
Las exonucleasas degradan los ácidos nucleicos desde un extremo de la molécula. Algunas actúan en la dirección 5'( 3'y otras en la dirección 3'—>5',eliminando nucleótidos del extremo 5'o del 3'respectivamente.
Las endonucleasas actúan en posiciones internas de la cadena, reduciéndola a fragmentos cada vez más pequeños.
ADN POLIMERASAS
La DNA polimerasa I de E. coli es un enzima con una sola cadena polipeptídica de 103 kD.
Cataliza la adición paso a paso de las unidades desoxirribonucleotídicas a la cadena de DNA:
(DNA)n +dNTP((DNA)n+1+ PPi
La DNA polimerasa I requiere los siguientes componentes para sintetizar una cadena de DNA:
1. Las cuatro clases de desoxirribonucleósidos 5'-trifosfato: dATP dGTP, dTTP y dCTP. También se requiere la presencia de Mg2+.
2. Un molde: la reacción de polimerización está dirigida por una cadena molde de DNA según las reglas de apareamiento de bases deWatson y Crick.
3. Un cebador: la DNA polimerasa une desoxirribonucleótidos a un grupo 3'-OH de una cadena preexistente. Los cebadores a menudo son cadenas de RNA en lugar de DNA. Enzimas específicos sintetizan estos cebadores donde y cuando son requeridos.
Después de añadir un nucleótido a una cadena de DNA, la DNA polimerasa se disocia o bien se traslada a lo largo del molde y añadeotro nucleótido. El número de nucleótidos añadidos antes de que la polimerasa se disocie define su procesividad.
La DNA polimerasa I también puede catalizar la hidrólisis del DNA así como su polimerización.
El enzima contiene actividad exonucleasa 3'(5'que tiene una función correctora de la polimerización.
La DNA polimerasa examina el resultado de cada adición que cataliza antes de laincorporación del siguiente nucleótido. Si se ha incorporado una base errónea (no apareante), la DNA polimerasa elimina el residuo incorrecto del extremo cebador antes de continuar con la polimerización.
Esta actividad exonucleasa 3'(5' mejora en gran medida la exactitud de la replicación del DNA. La DNA polimerasa solamente deja tras de sí un error cada 106 a 108 bases añadidas.
La DNA polimerasa I...
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