Reporte 1 Practicas 2

Anexo
TÉCNICAS DE EXTRACCIÓN, SEPARACIÓN Y PURIFICACIÓN DE COMPUESTOS BIOACTIVOS (XANTOFILAS, CAROTENOS, SULFORAFANO)
Carlos Alejandro Lara-Moreno, Luis Enrique Soto-Enríquez, Gustavo Adolfo Carrasco- Valenzuela, Guillermo Luis Arellano-Wattenbarger, Jesús Antonio Ceballos, Jorge Alberto Salmerón-Osuna
Introducción. La zanahoria (Daucus carota) es una hortaliza ampliamente consumida en la formade VMP, siendo rica en carotenoides especialmente β-caroteno, responsables de su color naranja y precursores de vitamina A. Resulta de interés desde el punto de vista nutricional, el estudio de los efectos de distintos factores ambientales como la luz, el oxígeno y la temperatura causantes del deterioro de estos compuestos.
Los carotenoides son los responsables de la gran mayoría de los coloresamarillos, anaranjados o rojos presentes en los alimentos vegetales, y también de los colores anaranjados de varios alimentos animales.Desde el punto de vista químico, pertenecen a la familia de los terpenos, es decir están formados por unidades de isopreno (ocho unidades, es decir, cuarenta átomos de carbono), y su biosíntesis se produce a partir de isopentenil pirofosfato. Esto produce sus rasgosestructurales más evidentes, la presencia de muchos dobles enlaces conjugados y de un buen número de ramificaciones de grupos metilo, situados en posiciones constantes. Se conocen alrededor de 600 compuestos de esta familia, que se dividen en dos tipos básicos: los carotenos, que son hidrocarburos, y las xantofilas, sus derivados oxigenados. A estos tipos hay que unir losapocarotenoides, de tamaño  menor, formados por ruptura de los carotenoides típicos.
Metodología. Primero se prepararon las soluciones 65 mililitros de la mezcla éter de (petróleo 45 v/v, metanol 15 v/v, benceno 5 v/v), 100 mililitros de metanol al 92%.
(Esto fue realizado en una campana de gas).
Anteriormente antes de la sesión se rallo y seco en estufa a 60°C y se almaceno en una bolsa ziploc.
Posteriormente seagregó 5 gramos de zanahoria en polvo y lo introducimos a 50 mililitros de la mezcla preparada, la dejamos reposar (agitándola de vez en cuando), la mezcla se filtró al vacío y se lavó el residuo con el resto de la mezcla extractora.
Se pasó el extracto a un embudo de separación, se lavó con 10 mililitros de agua , después con 10 mililitros de solución saturada de cloruro de sodio, descartando laparte acuosa.
Posteriormente, se extrajo la xantofila agregando a la capa de éter de petróleo de un volumen igual de metanol al 92 %. La capa se separa y se repite una vez más la extracción con metanol al 92 %. En la capa etérea quedan los carotenos.

Extracción de sulforafano y su purificación extracción en fase sólida.
Se macero 1 gramo de brócoli fresco, se dejó reposar durante 20 minutos y sele adiciono 10 mililitros de diclorometano, se dejó reposar la mezcla durante 20 minutos en el tubo (agitándose de vez en cuando).
Se filtró al vacío en un embudo de cristal y se recolecto el extracto orgánico.
Se preparó con una jeringa de 5 mililitros, una columna rellena con silica gel en polvo, se colocó una capa delgada de algodón al inicio y al final de la jeringa, se activó la columnacon silica gel por la elución de 3 ml de diclorometano. Se pasó el extracto orgánico a través de la columna, eliminando las impurezas adicionando 3 ml de acetato de etilo, finalmente se eluyo el compuesto bioactivo (Sulforafano) con 6 mililitros de metanol..
Eliminación del color de un extracto con carbón activo. Se maceró 1 gramo de hoja fresca, se adicionó 10 mililitros de etanol al 96 %, se dejóreposar durante 15 minutos (agitándolo de vez en cuando). Se filtró la mezcla al vació en un embudo de vidrio, para recolectar el extracto etanólico.
Se preparó una jeringa de 5 mililitros una columna rellena de carbón activado (Altura 0.5 centímetros).
Se colocó una capa de algodón al inicio y final de la jeringa. Se activó el carbón activado pasando etanol al 96%.
Se pasó el...