Reporte de Cromatografía en Papel

Páginas: 15 (3678 palabras) Publicado: 20 de octubre de 2013
Practica II.SEPARACIÓN DE PIGMENTOS VEGETALES POR
CROMATOGRAFÍA EN PAPEL.


Cromatografía en papel
Marco teórico.
ANTECEDENTES
La cromatografía de adsorción fue el primer método cromatográfico empleado para la
separación de mezclas de compuestos. La separación se basa en

un mecanismo de

adsorción selectiva y depende de la afinidad de las sustancias a separar con el adsorbente ysolventes empleados. [6]
Algunos pigmentos vegetales, de naturaleza lipídica pueden extraerse por medio de
solventes adecuados y separarse posteriormente empleando un método sencillo de
cromatografía de adsorción. Los pigmentos vegetales más comúnmente encontrados son las
clorofilas de coloración verde y responsables de la fotosíntesis, el β-caroteno de color
amarillo que es importante comoprecursor de

vitamina A, y las xantofilas que son

carotenoides que contienen oxígeno de color amarillo o naranja. [6]
Un sistema cromatográfico consta de dos fases: una móvil (solvente) y una estacionaria
(soporte); la separación de los componentes de una mezcla se produce por las interacciones
entre estos y las dos fases. En general, la sustancia con mayor afinidad por la fase
estacionariaviajará más lentamente y la de mayor afinidad por el solvente viajará más
rápido. [6]
Las diferentes sustancias tienen distinto grado de afinidad por el soporte y por lo tanto,
viajarán a distinta velocidad produciéndose la separación, están clasificados de acuerdo al
factor que causa la afinidad por la fase estacionaria. [6]



La cromatografía de adsorción se emplea para separar mezclasde todo tipo de sustancias y
muy especialmente para sustancias orgánicas. Sirve principalmente para mezclas de
sustancias no polares o moderadamente polares. [6]

La cromatografía en columna es la técnica de separación e identificación de sustancias
químicas, por la diferente retención que experimentan los componentes de una mezcla, al
ser más o menos adsorbidos por los componentes de unafase fija situada en una columna,
cuando son arrastrados por un fluido (fase móvil). Si la fase móvil es líquida hablamos de
cromatografía líquida y si es gas será cromatografía de gases. El adsorbente, suele ser gel
de sílice o alúmina, pero pueden ser otros. Intervienen los fenómenos de adsorción y
disolución, por consiguiente es fundamental tener en cuenta la polaridad, tanto de lassustancias a arrastrar como del disolvente, si queremos tener una buena separación. El
disolvente al descender arrastra las sustancias a distinta velocidad según la mayor o menor
retención que experimenten, y salen de la columna a distinto tiempo.

El tiempo de

retención es un parámetro útil porque es constante cuando se reproduce el experimento en
todas las condiciones, se pone en tablas y sirvepara identificar compuestos; es fundamental
en Cromatografía Líquida de Alta Resolución (HPLC) y en Cromatografía de Gases. [6]
Cromatografía en papel filtro.
Se basa en la diferencia de velocidad al desplazarse los distintos pigmentos sobre una banda
de papel poroso. Los pigmentos deben estar previamente disueltos en un disolvente. Los
más solubles se desplazarán más deprisa y los menossolubles más despacio, apareciendo
sobre el papel diferentes bandas de color. Para comprobarlo se ha utilizado un extracto de
hoja de espinaca disuelto en etanol y otro de hoja de lombarda disuelto en acetona. De
abajo arriba, con el extracto de espinaca se observan las siguientes bandas: clorofila a
(verde claro), clorofila b (verde oscuro), xantofilas (amarilla) y carotenos (anaranjada). Con
elde lombarda: clorofilas (verde), xantofilas (amarilla) y antocianinas (morada). [1]


Cromatografía en tubo de ensayo:
Se basa en la diferencia de solubilidad de los pigmentos. Con una mezcla de disolventes de
distinta densidad, podemos conseguir [1]

Los diferentes pigmentos se separen en bandas, ya que cada tipo de pigmento es soluble en
un tipo de disolvente. Utilizando el mismo...
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