reporte de fosfatasa

DETERMINACION DE FOSFATASA ALCALINA

OBJETIVO
Realizar correctamente nuestro procedimiento así como observar detenidamente los pasos a seguir para obtener un resultado confiable.

INTRODUCCION
La fosfatasa alcalina (ALP) es una enzima hidrolasa responsable de eliminar grupos de fosfatos de varios tipos de moléculas comonucleótidos, proteínas y alcaloides. El proceso de eliminar el grupofosfático se denomina desfosforilación. Como sugiere su nombre, las fosfatasas alcalinas son más efectivas en un entorno alcalino.
La fosfatasa alcalina recibe el nombre de orto-fosfórico-monoéster hidrolasa. Estas enzimas proceden de la ruptura normal de las células sanguíneas y de otros tejidos, muchas de ellas no tienen un papel metabólico en el plasma excepto las enzimas relacionadas con lacoagulación y con el sistema del complemento. La fosfatasa es una enzima clasificada dentro de las hidrolasas. Las fosfatasas alcalinas son enzimas que se encuentran presentes en casi todos los tejidos del organismo, siendo particularmente alta en huesos, hígado, placenta, intestinos y riñón. 
El análisis se realiza en el contexto de otras pruebas hepáticas (GOT, GPT, Bilirrubina, GammaGT) y seutiliza para evaluar problemas o alteraciones del hígado. Es muy sensible, sobre todo, en problemas de obstrucción de las vías biliares. Es la enzima más sensible a los problemas hepáticos producidos tumores metastásicos.
Suele asociarse a la elevación de la gamaGT, excepto que en los problemas óseos en solo se eleva la fosfatasa alcalina.



FUNDAMENTO
La fosfatasa alcalina (FAL) cataliza lahidrólisis del p-nitrofenilfosfato (pNPP) a pH 10,4 liberando p-nitrofenol y fosfato, según la siguiente reacción:
FAL
p-Nitrofenilfosfato + H2O -------------- p-Nitrofenol + Fosfato
La velocidad de formación del p-Nitrofenol, determinado fotométricamente, es proporcional a la concentración catalítica de fosfatasa alcalina en la muestraensayada.
MATERIAL
1 gradilla
1 charola
3 tubos de ensaye
1 pipeta pasteur
1 chuzo
1 vaso de precipitados
3 puntas azules

PROCEDIMIENTO
1.- tomamos una muestra sanguínea en tubo rojo.


2.- dejamos coagular nuestra muestra para después centrifugar .

3.- con ayuda de una pipeta pasteur pasamos el suero a un tubo de ensaye.

4.- etiquetamos un tubo como mejor nos pareciera solopara identificarlo y le agregamos 1ml de reactivo.


6.- después pasamos al espectrofotómetro e incubamos nuestro reactivo durante 3 minutos.





7.- transcurrido este tiempo agregamos nuestra muestra(suero) ,volvemos a incubar un minuto y realizamos nuestra primera lectura luego al minuto dos nuestra segunda lectura, y en el minuto tres realizamos la ultima lectura.




CUESTIONARIO1.- Fundamento de la determinación de fosfatasa alcalina.
La fosfatasa alcalina (FAL) cataliza la hidrólisis del p-nitrofenilfosfato (pNPP) a pH 10,4 liberando p-nitrofenol y fosfato, según la siguiente reacción:
FAL
p-Nitrofenilfosfato + H2O -------------- p-Nitrofenol + Fosfato
La velocidad de formación del p-Nitrofenol, determinadofotométricamente, es proporcional a la concentración catalítica de fosfatasa alcalina en la muestra ensayada.


2.- Alteraciones en las que se encuentren aumentada la fosfatasa alcalina.
Los niveles de fosfatasa alcalina superiores a los normales pueden deberse a:
Obstrucción biliar
Enfermedad ósea
Ingerir una comida grasosa si usted tiene el tipo de sangre O o B
Consolidación deuna fractura
Hepatitis
Hiperparatiroidismo
Leucemia
Enfermedad hepática
Linfoma
Tumores óseos osteoblásticos
Osteomalacia
Enfermedad de Paget
Raquitismo
Sarcoidosis


3.- Utilidad clínica de la fosfatasa alcalina.
Diagnóstico de enfermedades óseas en las cuales la actividad de las células óseas disminuye o aumenta. También se utiliza en el diagnóstico de afecciones hepáticas tales como la...