Reporte Hemoglobina

PRACTICA No. 7

AISLAMIENTO Y PROPIEDADES QUIMICAS DE LA HEMOGLOBINA

Departamento de Bioquímica, Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia, Universidad San Carlos de Guatemala, Carrera de Nutrición

INTRODUCCIÓN

La hemoglobina (Hb) es una proteína de la sangre, de masa molecular 64.450 (Daltons), de color rojo característico, que transporta el oxígeno desde los pulmones hasta los tejidosperiféricos y CO2 y H+ de los tejidos periféricos hacia los pulmones para ser excretados. La hemoglobina, consiste en dos pares (( y () de cadenas polipeptídicas. Las diversas cadenas se mantienen unidas por acción de fuerzas no covalentes, formando una proteína globular tridimensional. En la práctica de aislamiento y propiedades químicas de la hemoglobina se trabajó con 4 subtipos dehemoglobina, las cuales fueron Oxihemoglobina, Deoxihemoglobina, Metahemoglobina y Nitroacilhemoglobina, se midieron sus cualidades cualitativas y sus cantidades de absorción en el espectrofotómetro, para extraer la hemoglobina es necesario separar el plasma de la sangre de los glóbulos rojos, la solución clara que queda de la centrifugación es la oxihemoglobina que se diluye para realizar todas laspruebas cuantitativas y de absorbancia. (Murray,1988)
METODOLOGÍA
En la práctica se realizó la trasformación, preparación y determinación del espectro de absorción de los diferentes derivados de la hemoglobina de diferentes concentraciones. La realización de examen cualitativo se llevó a cabo aplicando diferentes soluciones para cada tipo de preparación de hemoglobina; la realización de examencualitativo se llevó a cabo aplicando diferentes soluciones a cada tipo de preparación de hemoglobina la cual se utilizó para las demás pruebas; para la Deoxihemoglobina se aplicó el reactivo de Stokes amoniacal, para la Metahemoglobina se aplicó Ferricianuro de Potasio, para la Nitrosilhemoglobina se aplicó la solución de ácido ascórbico 0.5M en buffer de acetato 0.5 M pH 4.5 y 1 gota de NaNO2 0.5Men el mismo buffer; en cada una hasta observar un cambio de coloración.
RESULTADOS

Tabla No. 1 Propiedades cualitativas:

|Nombre |Color |Color final |cambio |
| |inicial | |producido |
|oxihemoglobina |Rojo |Rojo claro |Cambio de |
| | | |coloración|
|Deoxihemoglobina |Rojo |Vino tinto | Cambio de |
| | |(coca-cola) |coloración |
|Metahemoglobina |Rojo |Mostaza |Cambio de |
| | |(pardo) |coloración |
|nitrosilhemoglobina |Rojo |Rojo |Cambio de |
| | |escarlata|coloración. |

Fuente de datos: obtenidos experimentalmente

Tabla No. 2 Espectro de absorción

|Longitud |ABS. |ABS. |ABS. |
|de onda |oxihemoglibina |metahemoglobina |Deoxihemoglobina |
|(nm) | | | |
|450 |1.554 |0.640 |1.500 |
|460|1.008 |0.604 |1.340 |
|470 |0.813 |0.598 |1.227 |
|480 |0.655 |0.617 |1.210 |
|490 |0.574 |0.679 |1.198 |
|500 |0.539 |0.718 |1.190 |
|510 |0.511 |0.683 |1.157|
|520 |0.569 |0.618 |1.135 |
|530 |0.967 |0.525 |1.088 |
|540 |1.256 |0.469 |1.103 |
|550 |0.985 |0.396 |1.005 |
|560 |0.763 |0.306 |0.934 |
|570 |0.912 |0.289...