REPORTE MICRO

Universidad de Sonora

División de ciencias biológicas y de la salud
Lic. en Biología



Microbiología



‘'Preparación de medios de cultivos: líquidos y sólidos’'



M.C Nolberta Huerta Aldaz.


Semestre 2014-1


Dannia Domínguez Alcaide.





Objetivos:
1. Elaborar diferentes medios de cultivo bacterianos: líquidos y sólidos.
2. Esterilización por medio de métodos húmedos: autoclave.
3.Aprender a inocular diferentes medios de cultivo.
4. Realizar observaciones de morfología colonial y celular en los medios de cultivo preparados.

Introducción:

Los medios de cultivo se comercializan desecados, en forma de polvo para su dilución y esterilización. Actualmente se pueden adquirir también medios sólidos ya preparados, dispuestos en frascos que se licúan mediante ebullición y sedispensan en placas. Medios líquidos en tubos y medios sólidos en placa, listos para su inoculación.

Un medio de cultivo está constituido por sustancias generalmente complejas que facilitan el crecimiento de las bacterias. Estas obtienen del medio las fuentes de carbono, nitrógeno, fósforo, potasio, sodio, magnesio y otros elementos o sustancias necesarias para su nutrición.

Los medios de cultivo sepueden clasificar de distintas maneras atendiendo a unas de sus características:
1. Según la composición:
Definidos: Se conocen exactamente las sustancias que los integran.
Indefinidos: Formados por sustancias de naturaleza compleja por ejemplo, peptonas.
2. Según su estado físico:
Sólidos.
Líquidos.
Semisólidos.
3. Según su aplicación:
Generales: Apropiados para el cultivo de la mayoría de lasbacterias.
Enriquecidos: Adicionados con nutrientes que permiten el crecimiento rápido de bacterias.
Especiales: Van dirigidos al cultivo de determinadas especies.
Selectivos: Contienen componentes que inhiben el desarrollo de ciertos microorganismos.1
Técnica de estría cruzada en placa (inoculación y aislamiento de bacterias):
En todas las siembras siguientes se debe quemar el asa al rojo vivo enla flama del mechero antes y después de usarla.
Con el asa bacteriológica previamente quemada y enfriada cerca del área aceptica, se siembra una mezcla de dos o mas bacterias en una placa de agar nutritivo. El método de siembra de estría cruzada consiste en ir girando la caja petri al ir rallando hasta formar una especie de pentágono, con el fin de ir diluyendo el inóculo.

Para inocular uncultivo líquido se toma con el asa previamente esterilizada, el inóculo de muestra y se introduce en el interior del tubo cuidando no tocar la paredes del mismo, una vez que el inóculo está dentro del medio, se mueve al asa en zig zag y se saca del tubo.2












Crecimiento bacteriano:
Cada tipo de bacteria requiere para su multiplicación una atmósfera y una temperatura adecuada. Por ello unavez sembrados los medios de cultivo deben de llevarse a la estufa en cuyo interior existe una temperatura óptima para el crecimiento de las bacterias que es de 35 a 37 grados centígrados para la mayoría de interés medico.3

Cuando la placa presenta crecimiento de colonias bacterianas, es importante evaluar su morfología. La morfología de las colonias bacterianas puede dar un primer indicio sobre quetipo de bacteria es la que se esta tratando.

Materiales y métodos:
Placas petri desechables.
Mechero bunsen.
3 Matraces erlenmeyer de 250mL
Balanza granataria
Probeta de 100 mL
Tubos de ensaye de 13x100 mL
Escobetillas
2 pipetas de 5mL
Algodón y gasa
Asa bacteriológico

Primeramente realizamos los cálculos para preparar el agar bacteriológico de cada uno de los medios.
Pesamos la cantidadnecesaria para los dos medios de cultivo y los colocamos en cada uno de los matraces respectivos.
Para los medios de cultivos sólidos encendimos un mechero bunsen y con mucho cuidado colocamos la mezcla del medio sobre la flama para calentar lentamente el matraz. Cuando todos los grumos habían desaparecido y las paredes del matraz lucían limpias, retiramos el matraz del fuego y dejamos enfriar...