Reporte

Universidad de San Carlos de Guatemala
Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia
Escuela de Química Biológica
Departamento de Microbiología
Bacteriología II
Instructor: Manuel Díaz

Iván Estuardo Roche 200618675
Laboratorio “C”

Introducción:

Se utilizaron dos métodos diferentes para aislar bacterias termófilas con requerimientos especiales a partir de una muestra de heces, ademásse utilizo una batería de pruebas para identificar la sub especie jejuni y diferenciarla. Se comprobó que ambas metodologías, filtración por membrana y aislamiento por una atmosfera selectiva son eficaces para su aislamiento.

Materiales y métodos:

Se inoculo una caja de agar sangre de cordero al 7% con un estriado común, la cual se incubo en jarra húmeda con paquetes de Gas-Pak paralograr una atmosfera de 10% de CO2, 5% de O2 y 85% de N2 a 42ºC durante 48 horas, además se utilizo un segundo método, el de filtración por membrana de poro 0.45μm, dejando caer entre 8 a 10 gotas de la muestra sobre la membrana en la superficie de una caja de agar sangre de cordero al 7% y dejando que filtrara durante 30 minutos posteriormente se incubo a 37ºC por 48 horas. Ambas cajas se revisarona las 24 y 48 horas. También se realizo una tinción de Gram con un tiempo de contrate con safranina de 10 minutos. Luego de las 48 horas se tomaron colonias aisladas para realizar la prueba de oxidasa y se inocularon tubos con medio TSI e Hipurato de sodio a 37ºC durante 72 horas; adicionalmente se inoculo una caja de agar sangre de cordero al 7% con un hisopo, realizando un estriado denso amanera de “tapete”, a partir de un tubo con medio BHI previamente inoculado con colonias aisladas y comparado con un estándar de MacFarland 0.5, una vez realizado el “tapete” en toda la caja de agar sangre se coloco un taxo de cefalotina y otro de acido nilidixico en lados opuesto de la caja y se incubo aproximadamente durante 72 horas. Luego de las 72 horas se agrego ninidrina al tubo conHipurato de sodio.

Resultados:

Tabla No 1:
Características de los aislamientos a las 24 horas de incubación

|  | Medio y Condiciones |
|  |ASC 7%, 37ºC, 24 hrs, aerobiosis |ASC 7%, 42ºC, 24 hrs, capnofilo |
|Técnica |filtrado pormembrana |condiciones selectivas |
|Crecimiento |no significativo |no significativo |

*Fuente de datos: experimental. hrs: horas. ASC: agar sangre de cordero.

Tabla No 2:
Características de los aislamientos a las 48 horas de incubación

|  |Medio y Condiciones |
|  |AS 7%, 37ºC, 48 hrs., aeróbico |AS 7%, 42ºC, 48 hrs., capnofilo |
|Técnica |filtrado por membrana |condiciones selectivas |
|Crecimiento |Leve|moderado |
|Características |colonias pequeñas, transparentes |colonias pequeñas, transparentes |
| |redondas, húmedas y brillantes, no muestran |redondas, húmedas y brillantes, no muestran |
| |reacción hemolítica|reacción hemolítica |
|Oxidasa |Positivo |Positivo |
|Gram |Bacilos Gram negativos en forma |bacilos gram negativos en forma |
|  |de "S" |de "S"...