reporte

Un nuevo método para la determinación amperométrica actividad antioxidante utilizando DPPH radicales libres
Resumen
Un nuevo método para la determinación de la actividad antioxidante basado en la reducción amperométrica de 2,2-difenil-1-picrilhidracilo (DPPH) en el electrodo de carbono vítreo se propone. Todos los experimentos se realizaron en la celda electroquímica de tres electrodos en 140mV frente a Hg2Cl2 | 3 M KCl usando solución etanólica (u = 40%) y 0,033 M de KCl en tampón de fosfato 0,033, pH = 7,4. El intervalo lineal obtenido para Trolox en 100 AM DPPH solución de etanol-agua estaba a 30 AM, con un límite de detección de 0,05 PM. El método desarrollado se aplicó para la evaluación de la actividad antioxidante de algo de agua o etanol compuestos puros solubles deantioxidantes y de las muestras de té, vino y otras bebidas. La buena correlación entre las mediciones (R2 = 0,9993) expresado como Trolox equivalente se obtuvo entre el método amperométrico propuesto y el método espectroscópico clásico. D 2005 Elsevier B.V. Todos los derechos reservados.
Introducción
Existe amplia evidencia de una asociación entre el estrés oxidativo que resulta de la generación deradicales y insuficiencia antioxidante y daño tisular. La oxidación lipídica como resultado de la reacción en cadena de radicales causa la pérdida de calidad en sabor, color y valor nutritivo de los alimentos. Por lo tanto muchos métodos para la determinación de la actividad antioxidante en los alimentos Se han propuesto muestras y fluidos biológicos durante el década pasada. Se basan principalmenteen la reacción entre un cromógeno compuesto y un antioxidante. Después de la reacción, la concentración residual de compuesto cromógeno se determina espectrofotométricamente o colorimétricamente [1-5]. Los compuestos cromógenos más utilizadas se incluyen 2,2 Vazino- bis (3-etilbenzotiazolina)-6-sulfónico (ABTS) y 2,2-difenil-1-picrilhidracilo (DPPH) porque reaccionar directa y rápidamente concompuestos antioxidantes. Radical libre reacciona DPPHI con un antioxidante (AH) o una especies de radicales (RI) de acuerdo con las Ecs. (1) y (2).
Resultados y discusión
Voltametría cíclica de DPPH
Voltamograma cíclico de DPPH (fig. 2, línea gruesa) muestra existencia de dos pares redox, pero el único par redox importante para la determinación de la actividad antioxidante es DPPHI | DPPH.Catódica (251 mV) y anódico (310 mV) picos se refieren a la (DPPHI | DPPH) par redox se mencionó anteriormente. La diferencia entre los potenciales de pico de 59 mV implica reversibilidad de la pareja redox. relación lineal (R2 = 0,997) entre la corriente de pico y la raíz cuadrada de velocidad de barrido es indicación de la control de la difusión de la actual sin complicación por proceso de adsorción enel electrodo de carbón vítreo.
Voltametría cíclica de antioxidantes
En los voltamogramas cíclicos (Fig. 1a) de etanol soluble antioxidante (1 mM), picos oxidativos aparecieron en 153 mV (1), 334 mV (3), 335 mV (4) y 491 mV (5) para la quercetina, curcumina, sinápico y ácido ferúlico, respectivamente, pero sin evidencia de cualquier pico de reducción reversible. pico oxidativo Se observó, sinmáximo definido en el cíclico voltamograma de (+) catequina (2).
La figura. 1. (a) voltamogramas cíclicos de los antioxidantes solubles etanólicos: (1) quercetina, (2) catequina, (3) la curcumina, (4) ácido sinápico, (5) ácido ferúlico. (b) voltametríacíclica de antioxidantes solubles en agua: (6) 40% solución de etanol-agua que contiene 0,03 M de KCl, pH = 7,4, (7) N-acetyll- cisteína, (8) ácidoascórbico, (9) ácido úrico, (10) ácido gálico. Velocidad de lectura 20 mV / s, la concentración de antioxidante 1 mM, electrolito de soporte: solución tampón de fosfato (0,03 M, pH = 7,4) que contiene 0,03 M de KCl.
Voltamogramas cíclicos de los antioxidantes solubles en agua (Fig. 1b) muestran picos de oxidación irreversibles a 238, 350 y 400 mV para ascórbico (8), úrico (9) y ácido gálico...