Reportes

La Revista Internacional de Bioquímica y Biología Celular
Volumen 30, Número 4 , 30 de abril de 1998, Pages 517-527

Transición de permeabilidad mitocondrial inducida por la reticulación de la translocasa de nucleótidos de adenina
* Cecilia Zazueta ,
* Horacio Reyes-Vivas ,
* Gabriela Zafra ,
* César A. Sánchez ,
* Gabriela Vera ,
* Edmundo Chávez
* Departamento deBioquímica, Instituto Nacional de Cardiología Ignacio Chávez, Juan Badiano No. 1, 014080 México, DF, México
* http://dx.doi.org/10.1016/S1357-2725 (97) 00157-X , Cómo citar o enlazar Uso de traducción
* Permisos y reimpresiones

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Abstracto
Transición de permeabilidad mitocondrial es causada por la apertura de un poro transmembrana cuya naturaleza química no se hademostrado hasta el momento. El presente trabajo fue dirigido a contribuir aún más al conocimiento de la entidad membrana compuesta en la formación de la canal no específica. El aumento de la permeabilidad se estableció mediante el análisis de la incapacidad del riñón de rata mitocondrias de absorber y acumular Ca 2 + , así como su fracaso en constituir un potencial transmembrana, después de lareticulación de proteínas de la membrana por cobre además de orto -fenantrolina. Para identificar las proteínas reticuladas, electroforesis en gel de poliacrilamida se realizó. Los resultados son representativos de al menos tres experimentos separados. Se indica que 30  μ M Cu 2 + indujo la liberación de 4,3 nmol Ca 2 + mg de proteína por. Sin embargo, en presencia de 100  μ M orto -fenantrolina sólo2  μ M Cu 2 + se requiere para lograr la liberación total de la acumulada Ca 2 + , hay que señalar que tal reacción no es inhibida por la ciclosporina. El aumento de la permeabilidad corresponde a la reticulación de proteínas de membrana en la que aproximadamente 4 grupos tiol nmol por mg de proteína parecen estar implicados. Tal proceso de unión se inhibe por carboxyatractyloside. Mediante eluso de la sonda fluorescente eosina-5-maleimida la etiqueta se encuentra en una de reticulación 60 kDa dímero de dos monómeros de 30 kDa. De los datos presentados se concluye que el cobre- o -fenantrolina induce la reticulación intermolecular de la translocasa de nucleótidos de adenina que a su vez se convierte en no específica de los poros.
Palabras clave
* Las mitocondrias; 
* Transportede calcio; 
* Proteína de reticulación; 
* Translocasa de nucleótidos de adenina;
* Transición de la permeabilidad; 
* Membrana grupos tiol; 
* Cobre- orto -fenantrolina

Figuras y tablas de este artículo:

La figura. . 1  mitocondrial de Ca 2 + liberación inducida por concentraciones crecientes de cobre (2 mg de proteína) se añadieron a 3 ml de una que contiene medios decomunicación: 125 mM KCl, 10 mM de succinato, 10 mM HEPES, 2 mM de fosfato, 50  μ M 45 de CaCl 2 (sp. acto 1000 cpm / nmol.), 200  μ M ADP y 10  μ g rotenona, los medios se ajustaron a pH 7,3. Después de 1 min de incubación de una alícuota de 0,2 ml se retiró y se filtró a través de un filtro Millipore de 0,45  μ m de diámetro de poro y la radioactividad retenida en el filtro se midió en uncontador de centelleo. (A) Ca 2 +eflujo fue inducida por las concentraciones de cobre indicados. (B) La parcela doble recíproco de Cu 2 +concentraciones contra nmol Ca 2 + liberado por min por mg de proteína. Temperatura: 25 ° C.
Opciones Figura

La figura. 2.  mitocondrial Ca 2 + liberación inducida por cobre o -fenantrolina. Las condiciones experimentales fueron similares a los descritos para lafigura. 1 , excepto que radiomarcado Ca 2 + no se utilizó y que el 50  μ M Arsenazo III fue agregado a medir Ca 2 + movimiento. Donde se indique ya sea 2  μ M Cu 2 + , o 100  μ M o -fenantrolina (op), o 0,166 μ M rojo de rutenio (RR) fue añadido. Temperatura: 25 ° C.
Opciones Figura

La figura. 3.  Efecto de la ciclosporina A sobre Ca 2 + liberación por cobre y cobre- o -fenantrolina. Las...