Represion Catabolica

Practica: “represión catabólica”
Equipo: 6

Práctica no. 1
“Represión Catabólica”

Introducción
La represión catabólica por carbono (RCC) ha sido definida como la inhibición de la expresión de genes requeridos para la utilización de fuentes de carbono secundarias, causada por sustratos carbonados que son degradados rápidamente. El mecanismo responsable de éste efecto involucra eltransporte y metabolismo de la fuente de carbono represora.

Es el mecanismo más común de represión en la inhibición en la síntesis de enzimas generalmente inducibles, por intermediarios producidos en el catabolismo de la fuente de carbono. En la tabla 1 se muestran algunos ejemplos de enzimas sujetas a represión catabólica.

Tabla 1. Ejemplos de enzimas sujetas a represión catabólica

Se sabe queeste mecanismo puede operar a distintos niveles (trascripción, procesamiento de RNA, traducción y modificación de proteínas), generando respuestas que afectan directa o indirectamente la actividad de las enzimas sensibles al fenómeno (exclusión de inductores, represión transcripcional o interrupción de la traducción de proteínas) (Kwakman & Postma, 1994).
Todos los genes u operones queparticipan en el catabolismo de carbohidratos son regulados por proteínas de control específico e inductores requeridos para su expresión. El control directo de la actividad de los reguladores, o de la formación de inductores, es una medida eficiente para silenciar la expresión. Por estos mecanismos las bacterias son capaces de establecer una jerarquía en la utilización de carbohidratos (Bruckner& Titgemeyer, 2002) y las capacita para incrementar su nutrición con miras a optimizar su tasa de crecimiento en ambientes naturales donde existen mezclas complejas de nutrientes (Stülke & Hillen, 1999).
La elección de un carbohidrato determinado es hecha a nivel de inducción azúcar-específico. La represión de los genes empleados en la utilización de carbohidratos alternos asegura queúnicamente sea expresada una cantidad mínima de genes, para producir una cierta cantidad de energía y elementos carbonados a partir de una fuente de carbono. Así, la utilización jerárquica de azúcares significa usar carbono y fuentes de energía económicas (Bruckner & Titgemeyer, 2002).
Un mecanismo menos frecuente de inhibición lo constituye la autorepresión, mecanismo mediante el cual la síntesisde enzima se ve reprimida por la presencia de productos finales de biosíntesis. Un ejemplo lo constituye el efecto de ciertos aminoácidos del medio de cultivo en la síntesis de proteínas.
Objetivo
Observar el crecimiento de Saccharomyces Cerevisiae tomando en cuenta la represión catabólica de carbono, utilizando tres fuentes de carbono distintas glucosa 0.5%, Alcohol etílico 3% y2-desoxi-glucosa 0.2%
Material.

* 3 Matraz Erlenmayer de 250mL.
* 1 Matraz Erlenmayer 100mL.
* 2 Probetas graduadas de 250mL.
* 1 Pipeta de 10mL.
* 2 Espátulas.
* 1 Asa de siembra.
* 1 Mechero Fisher.
* 1 Piceta (250mL) con agua destilada.
* 1 Piceta(250mL) con etanol.
* 1 Barra magnética de 2.5cm (aprox).
* 1 potenciómetro.
* 10 Cajas de Petri desechables.* Gasa y algodó

Metodología.
1. Lavar el material.
Preparar los siguientes medios de cultivo:
Medio 1.
Glucosa. | 0.5% |
(NH4)2SO4 | 0.1% |
KH2PO4 | 0.05% |
Extracto de levadura. | 0.2% |
Agar bacteriológico. | 2% |
Medio 2.
Alcohol etílico absoluto. | 3% |
(NH4)2SO4 | 0.1% |
KH2PO4 | 0.05% |
Extracto de levadura. | 0.2% |
Agar bacteriológico. | 2% |
Medio 3.2-Desoxi-glucosa. | 0.2% |
Alcohol etílico absoluto. | 3% |
(NH4)2SO4 | 0.1% |
KH2PO4 | 0.05% |
Extracto de levadura. | 0.2% |
Agar bacteriológico. | 2% |

Ajustar el pH de los tres medio a un pH de 7.
2. Esterilizar los medios de cultivo.
3. Prepara el área estéril.
a) Lavar el área de trabajo con jabón.
b) Realizar una asepsia del área de trabajo con alcohol,...