Reseñas
Descubrimiento de antibióticos mediante bacteriófagos S. aureus
- inmunocompetentes - nosocomiales - resistencia
Estrategias de genómica funcional:
Proteínasesenciales -aislamiento de mutantes sensibles-temperatura -Inactivación por antisentido - inserciones / deleciones cromosomas
Moléculas pequeñas o productos naturales
Moléculas abundantes
Nuevaaproximación
Bacteriófagos
Información proteínas clave
Ejemplo: Escherichia coli
FAGO PROTEINA PROTEINA CELULAR ACCIÓN
T7 T4
gp2 AsiA
RNApolimerasa σ70
inhibe síntesis de RNAinteracción deRNA polimerasa con factores σ del fago
λ P2
P B DnaB helicasa redirigir hacia origenes de replicación bacterianos
FAGOTERAPIA
26 CEPAS DE FAGOS
895 ORFs
31 familiaspolipeptídicas Diferentes proteínas =diana celular proteínas susceptibles
Cinética Cromatografía de afinidad
Western Sistema del doble híbrido
Determinación de constantes cinéticas
Ensayobimolecular
TR-FRET
DnaI es esencial
para el crecimiento celular
77ORF104 inhibe la síntesis
de DNA
Ensayos de TR-FRET con 125000 móleculas
7 proteínas víricas actuan sobre 4proteínas de la maquinaria celular
Fusión celular dirigida
H Virus sarampión Péptido fusogénico F CD46 y SLAM Fusión celular
H modificada CD46 SLAM+scFV scFV:CEA y CD38 EGFR
Experimentos conCHO-CD38
menor eficiencia
:481
Western
Fusión celular y viabilidad
Fusión homóloga
Fusión heteróloga
Ej: citoreducción del cáncer
Ej: inmunomodulación
UTILIZACIÓN DE VIRUSCOMO VECTORES PARA LA DETECCIÓN DE TUMORES
-VIRUS SINDBIS
-VIRUS DE LA VACUNA
VECTORES VIRALES SINDBIS
VECTORES VIRALES SINDBIS
• PROCEDEN DEL VIRUS SINDBIS, PERO SON DEFECTIVOS PARA LAREPLICACIÓN. (Incapaces de formar nuevas partículas víricas). EN SU GENOMA TRANSPORTAN UN GEN QUE CODIFICA UNA PROTEÍNA FACILMENTE DETECTABLE: - LUCIFERASA - β-GALACTOSIDASA SE DISTRIBUYEN POR EL...
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