Resumen Bohinski Tema 3
Consiste en empacar columnas delgadas de iones de partículas esféricas de fase solida, reducir los espacios muertos entre ellos y elevar al máximo las sustancias q pasan a través de dicha columna. El empacado disminuye la velocidad de flujo del disolvente , y es necesario aplicar alta presión.
Cromatografía en papel
Se utiliza en dichacromatografía un filtro de celulosa(hoja de papel filtro) para sostener un liquido, dicho papel se humedece por la absorción de vapor de agua y luego se permite que otro disolvente migre hacia arriba o hacia abajo del papel por acción capilar,cuando el disolvente de revelado llega al papel en el cual se puso la muestra cada sustancia se divide por su fase apolar migratoria y fase polar estacionaria, lassustancias mas solubles al agua son mas lentas mientras q las de fase organica se miden a partir del origen donde se coloco la muestra.
Cromatografía en capa delgada
Consiste en el uso de una fase solida dispuesta en forma de una delgada capa sobre la superficie de un vidrio o plástico , la fase solida puede funcionar como absorvente, como intercambiador ionico, o como criba molecular, elprocedimiento es similar al de la cromatografía en papel.
Electroforesis
Consiste en mover partículas cargadas dentro de un campo eléctrico (iones), este desplazamiento ocurre en un medio liquido sostenido por una sustancia inerte, ejemplo un papel o un gel , el liquido sirve como conductor de electricidad, se les aplica una pequeña carga y se mueven , el grado de omovimiento se llama movilidadelectroforética, al incrementarse la carga también incrementa la movilidad
Electroforesis en papel
Se usa un papel o filtro humedecido de manera uniforme con una solución amortiguadora, las muestras se aplican en un punto de origen determinado del papel, se aplica voltaje y los solutos se desplazan hacia zonas q los atraen o sea los polos, abriéndose paso a través del papel, el uso de alto voltajeda mejores resultados, usada en sustancias de bajo peso molecular.
Electroforesis en gel
La electroforesis en gel es usada para sustancias de alto peso molecular ,como en ADN o ARN , los geles agarosa y poliacrilamida son los mas usados, son bien porosos , el primero mas amplio que el segundo , la porosidad reflejara las dimensiones de los iones en movimiento, y los geles pueden solidificarse enplacas o barras delgadas , son fáciles y firmes de manipular.
REACCIONES QUIMICAS DE LOS AMINOACIDOS
Deteccion y medición cuantitativa
A los aminoácidos primarios se los evalua midiendo la absorción con luz de onda de 540nm, la intensidad del color, otros como ser los secudarios son amarillos y tienen máxima absorción a 440nm se basa en el índice de Beer-Lambert.
Identificación de losaminoácidos mediante sus derivados
Los derivados de la feniltiohidantoina son los que absorben luz ultravioleta,los derivados del dansilo son fluorescentes y los derivados del dinitrofenilo son amarillos, son útiles para identificación de los aminoácidos.
Modificación de los grupos R de los polipeptidos
Son utilizados para determinar la presencia de cierto aminoácido en los polipeptidos , que sonescenciales para la conformación de su estructura y funcionamiento . el tetranitrometano es especifico para la tirosina, otro importantes es el SH de la cisteína , el grupo R tiene una modificación llamada yodación radiactiva, que marca un isotopo radiactivo detectándolo en las mas minimas cantidades, son indispensables en un buen numero de investigaciones bioquímicas.
El ATP reacciona con losaminoácidos in vivo
El ATP es un compuesto rico en energía y se utiliza en casi todas las reacciones, tiene 2 tipos de reacciones dependientes de el ,implicando la adhesión de un nucleofilo a una cierta porción de el:
1. Ataca al atomo alpha del fosforo
2. Ataca al atomo y-fosforo
varios de estos aminoácidos controlados por la especificidad de las enzimas pueden reaccionar con el ATP de...
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