Resumen De Biologia R 1

Resumen de biología (Cooper)

Capitulo 1 – Visión global de las células e investigación celular

Microscopia
MO: limite de resolución: 0,2 micrometros
-De campo luminoso: cel teñidas muertas
-De contraste de fase y de interferencia-contraste diferencial: cel vivas  una es video potenciada: mov de organelas marcados
-De fluorescencia: para ver moléculas, ej. Proteínas vivas o muertas. Tinciónfluorescente con proteínas GFP que se pega a la diana
-FRAP: para medir la tasa de mov de las proteínas.
-FRET: se ve la interacción de 2 proteínas en una celula.
-Confocal: mas detallada q la de fluorescencia
-de exitación multifotónica: se ven células vivas tridimensionales con laser.

ME: limite de resolución: 0,004 nanometros
-MET: tintes positivos o negativos
-Tomografía electrónica: 3d apartir de 2d
-Sombreado de metal: superficies de estructuras subcelulares o macromoléculas. Imagen 3D por sombreado
(Kriofractura: separación por congelación con un bisturí para ver elementos de la membrana)
-MEB: imágenes 3D limite de resolución: 10 nanometros. SOLO células enteras (superficie). Para endocitosis y exocitosis, cilios y flagelos

Separacion/fraccionamiento subcelular-Centrifugación diferencial: aislar organelas
1. Para hacer la centrifugación hay que romper la membrana plasmática y RE: por licuación, sonicación, detergente, reducción, shock osmótico (ponerlo en agua)
2. Ultracentrifugacion: las estructuras se van sedimentando (decantando) según el peso. Lo primero q decanta (lo mas pesado) son el nucleo y cél enteras que quedaron sin romper. Lo segundo que decantan sonmitocondrias, cloroplastos, lisosomas y peroxisomas. Lo tercero que decanta son fragmentos de membrana plasmática y de RE. Lo ultimo que decanta son ribosomas y citosol
Pelet: lo que cae. Sobrenadante: lo que queda arriba.
-Centrifugacion en gradiente de densidad: separa organelas de similar tamaño. Ej. sacarosa
-Centrifugación de equilibrio: separar compuestos subcelulares en función de sumigración en un gradiente de densidad.
Shock de baja osmolaridad: para membrana de mitocondrias

Cultivos

Proteomica: análisis de las proteínas
-Proteoma: identificación y cuantificación, interacción y localizacion de las proteínas
-Metodos para identificar proteínas:
Electroforesis en gel bidimensional: separación de proteínas a gran escala (proteínas mas abundantes).
1 electroforesis: se establece ungradiente de pH y se separan según su carga
2 electroforesis: se separan por tamaño molecular
3. se tiñe el gel para verlas
4. se las extrae del gel y se las identifica en una base de datos por espectrometría de masas
-Metodos para localizar proteínas: fraccionamiento celular + marcar con GFP y miras con microscopio de fluorescencia
-Metodos para la interacción de proteínas: se aíslan proteínasde forman suaves para q sigan formando parte del complejo y se hace una espectometria de masas.


Capítulo 5 – Organización y secuenciación de los genomas celulares

COMPLEJIDAD DE LOS GENOMAS DE EUCARIOTAS

Intrones y exones
Secuencias espaciadoras: Algunos ADN no codificantes en eucariotas representan largas secuencias de ADN que residen entre genes
Exones: secuencias codificantes
Intrones:secuencias no codificantes. No son universales. Casi todos los genes de las histonas, por ejemplo, carecen de intrones. La presencia o ausencia de intrones no es por tanto una distinción absoluta entre los genes procariotas y eucariotas. Muchos intrones codifican ARN funcionales, como las pequeñas moléculas de ARN nucleolar que intervienen en el procesamiento del ARN ribosómico y los microARN queactúan como reguladores destacados de la expresión génica en las células eucariotas. De igual modo, los intrones contienen secuencias reguladoras que controlan la transcripción y el procesamiento del ARNm.

Secuencias de ADN repetitivas
Las hebras desnaturalizadas de ADN hibridan unas con otras (se reasocian), volviendo a formar moléculas de doble hebra.

3 Clases de secuencias repetitivas:
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