Resumen final Diagnostico de N
Facultad de Ciencias químicas y Farmacia
Escuela de Química Biológica
Departamento de Bioquímica
Biología molecular
Sofía Soberanis 201013525
CindyVillalobos 201214502
Geordy Gonzalez 201214409
Consuelo Acajabon 201214379
RESUMEN
“Diagnosis of Neisseria gonorrhoeae Using Molecular Beacon”
Los métodos de PCR son muy específicos y sensibles, y de menortiempo empleado que los convencionales cultivos. Sin embargo, los ensayos moleculares han fallado en su implementación en el mercado de países en desarrollo, pues son altamente cotosos, hay ausenciade infraestructura e igual deficiencia de conocimientos disponibles en configuraciones de recursos limitados. Los métodos PCR pueden estar expuestos a variabilidades experimentales, aunque se venminimizadas con equipo automatizado de recolección de muestra y alto rendimiento de amplificación; pero estos son demasiado caros. El estudio presente se centró en el diseño de un ensayo de visualizaciónpara la detección de Neisseiria gonorrhoeae usando marcadores moleculares (diseñados para la región complementaria dentro de los amplicones del gen orf1, que comprendieron dos pares de emisión5’fluoroforo-extintor 3’ diferentes, siendo Cy3-Dabcyl y FAM.BHQ2), en un PCR asimétrico usando 40pmoles del primer con sentido y 20pmoles del primer de antisentido; proporcionando más copias de la hebracomplementaria a probar; que se hibrida a los señalizadores moleculares marcados. El método fue comparado con otros métodos de detección como un PCR convencional y un kit AMPLICOR.
Los resultados nofueron tan sensibles como el kit AMPLICOR (de costos elevados igualmente), pero la utilización de señalizadores hizo la detección más fácil. Pues si bien, la amplificación del ADN se realiza de igualmanera en un termocliclador, es seguido de una detección de punto final a través de un lector oscuro o lector de ELISA. Esto minimiza los costos; puesto que un lector de luz oscura es mucho más...
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