resumenes

Fundamentos de bioquímica II.
Laboratorio #1.
Colorimetría y espectrofotometría.

Resultados.

Datos del espectro de KMn04



Curva de calibración KMnO4


Cálculo de concentración.

Tubo #1

Tubo #2

Tubo #3

Tubo #4

Tubo #5


Preguntas del taller.
1. Graficas en papel milimetrado.
A. Grafica de espectro de KMnO₄ 2,5 x 10⁻₄





B. Grafica de Absorbancia v.sConcentración de KMn0₄

Cálculo de concentración.

Tubo #1

Tubo #2

Tubo #3

Tubo #4

Tubo #5





2. Grafica de la curva de calibración para el KMnO₄ y la concentración de la muestra problema por extrapolación.


Valor de la muestra problema calculado por extrapolación. 0,000116







3. ¿Qué importancia tienen estas pruebas? ¿Es necesario utilizar un estándar opatrón?
Las pruebas en el espectrofotómetro es indispensables ya que permite precisar la concentración de una sustancia, por medio de la absorbancia de ésta, la cual es proporcional a la concentración, por tanto a mayor absorbancia, mayor será la concentración.
Estas mediciones se pueden aplicar para determinar la concentración de pruebas biológicas (perfil lipídico, muestras de orina, glucemia,enzimas en sangre) de aquí radica la importancia de estas pruebas porque sirven como indicador correctivo o profiláctico de distintos trastornos del organismo.
Por ejemplo la prueba de orina sirve para detectar cocaína o benzoilecgonina en orinas de pacientes farmacodependientes en proceso de rehabilitación. La glucemia sirve para detectar la diabetes. Enzimas en sangre pueden diagnosticar dañosen el hígado o corazón.
Cada componente de la solución tiene su patrón de absorción de luz característico. Comparando la longitud de onda y la intensidad del máximo de absorción de luz de una muestra versus soluciones standard, es posible determinar la identidad y la concentración de componentes disueltos en la muestra (solución problema). 

4. Investigue el método para la determinación de laglucosa en sangre, los valores normales en hombres y mujer.

La prueba es específica para la glucosa y se basa en el método de glucosa oxidasa, la enzima glucosa oxidasa (GOD) es una oxidoreductora que cataliza la oxidación de la glucosa para formar peróxido de hidrogeno (H2O2). El GOD necesita al cofactor flavín adenin dinucleótido (FAD). El FAD es un componente común en las reacciones deoxidorredución biológica. La GOD es comúnmente usada en reacciones con presencia de peróxidasa que permite colorimetría mente el H2O2 formado.
En la primera reacción (reacción específica), catalizada por la enzima glucosa oxidasa (GOD), se oxida la glucosa y se genera H2O2. En la segunda reacción (reacción indicadora), la enzima peróxidasa (POD) cataliza la descomposición del H2O2 lo que provocaoxidación de un cromógeno que pasa de su forma reducida (incolora) a su forma oxidada (coloreada). La aparición del cromógeno oxidado se evalúa mediante un espectrofotómetro y será directamente proporcional a la concentración de glucosa en la muestra.
Los niveles de azúcar sanguíneos seguros para los hombres son 70-100 mg / dl (miligramos por decilitro), cuando se mide por la técnica de ayuno, 70-140mg / dl cuando se mide con el método postprandial, y 70-125 mg / dl en las pruebas al azar.


Discusión

La práctica del laboratorio de Colorimetria y Espectrofotometria se pudo realizar siguiendo un procedimiento establecido que constaba de 4 pasos. El primer paso se realizó verificando que el calorímetro estuviera en modo de transmitancia y que la longitud de onda de inicio fuera de 400 nm,lo que se pudo calibrar en conjunto con todos los compañeros del grupo. En la curva espectral del KMnO4 2.5 x 10-4 M, nos pudimos dar cuenta de que era necesario calibrar cada vez que se cambiaba la longitud de onda con el blanco de agua para poder leer la absorbancia de la solución cada 10 nm en el rango de longitud de onda de 400 a 600 nm. Según los datos la absorbancia máxima que alcanzó la...