retos microbianos

Páginas: 5 (1217 palabras) Publicado: 19 de agosto de 2015

1. Objetivo
1.1. Comprobar la efectividad de los sanitizantes y desinfectantes que se utilizan en el proceso de limpieza, sanitización y desinfección de equipos y áreas, poniéndolos a prueba ante una concentración conocida de microorganismos.

2. Alcance
2.1. Este procedimiento es aplicable para todos los sanitizantes y desinfectados utilizados en planta.
2.2. Los sanitizantes ydesinfectantes se analizarán a la entrada de cada lote para su aprobación.

3. Responsabilidades

3.1. Responsable sanitario

Aprobar y firmar este PNO

3.2. Gerente de Aseguramiento de Calidad

Revisar y firmar este PNO

3.3. Gerente de Control de Calidad
Redactar este PNO
Subir PNO al Sistema Masterweb para su revisión y aprobación.
Administrar la copia controlada del PNO y divulgar el contenido entre elpersonal de control de calidad.
Evaluar la comprensión y aplicación del procedimiento.
Verificar el cumplimento del procedimiento.

3.4. Responsable de Microbiología
Redactar el PNO
Subir el PNO al sistema Masterweb para su revisión y aprobación
Realizar actualizaciones del procedimiento cuando se requiera.

3.5. Analista de Microbiología
Conocer y ejecutar el PNO.

4. Desarrollo del proceso4.1. Medidas de seguridad
4.1.1. Bata de laboratorio
4.1.2. Guantes de látex
4.1.3. Cubrebocas

4.2. Materiales y Equipo
4.2.1. Agua purificada
4.2.2. Matraces Erlenmeyer de 250 mL con tapón rosca
4.2.3. Matraces Erlenmeyer de 500 mL con tapón rosca
4.2.4. Matraz de aforación de 1000 mL
4.2.5. Matraz de aforación de 100 mL
4.2.6. Probeta de vidrio de 100 mL
4.2.7. Pipeta volumétrica de 10 mL4.2.8. Tubos de ensaye de 18x150 mm con tapón rosca.
4.2.9. Cajas petri estériles de 90x15 mm.
4.2.10. Gradilla
4.2.11. Autoclave
4.2.12. Espectrofotómetro
4.2.13. Vortex
4.2.14. Incubadora a 33ºC
4.2.15. Pipeteador 3M de 5mL
4.2.16. Puntillas de 5 mL estériles
4.2.17. Timer

4.3. Medios de cultivo
4.3.1. Agar Soya Tripticaseína
4.3.1.1. Se prepara según las instrucciones del fabricantey se esteriliza en autoclave









4.3.1 Medios de cultivo.

Agar soya Tripticaseína.
Se prepara según las instrucciones del fabricante y se esteriliza en autoclave. Mantener líquido en temperatura aproximada de 45-48˚C.

Agar neutralizante
Se prepara según las instrucciones del fabricante y se esteriliza en autoclave. Mantener líquido en temperatura aproximada de 45-48˚C.



Agarnutritivo.
Se prepara según las instrucciones del fabricante y se esteriliza en autoclave. Mantener líquido en temperatura aproximada de 45-48˚C.


4.3.2 Soluciones.

Solución amortiguadora de fosfatos 0,25 M (solución concentrada)

En un matraz volumétrico de 1000 mL, disolver 34 g de fosfato monobásico de potasio en 500 mL de agua, ajustar el pH entre 7,1 y 7,3 con la solución de hidróxido desodio, aforar con agua, mezclar y distribuir en porciones de 100 mL esterilizar en autoclave, dejar enfriar y conservar en refrigeración.

Solución amortiguadora de fosfatos (solución diluida)

Colocar 1,25 mL de la solución amortiguadora de fosfatos 0,25 M en un matraz volumétrico en 1 L y llevar a volumen con agua, mezclar y distribuir en porciones de 9 mL y 99 M, en tubos y matraces,respectivamente, esterilizar en autoclave.


Caldo neutralizante.

Se prepara según las instrucciones del fabricante y se esteriliza en autoclave. Conservar en refrigeración de 2º a 8ºC.


Solución salina.

Disolver 8.5g de cloruro de sodio en 1000 mL de agua purificada y esterilizar en autoclave.

.

4.3.3 Microorganismos de prueba:


Escherichia coli.
Staphylococcus aureus.

4.4 Preparación yacondicionamiento de la muestra

Efectuar dos resiembras de cada uno de los microorganismos de prueba e incubar de 20 h a 24 h a una temperatura 33°C ± 2°C.
A partir de estos cultivos, resembrar cada uno de los microorganismos e prueba, en tubos que contengan 12 mL de Agar nutritivo inclinado e incubar de 20 h a 24 h a una temperatura 33°C ± 2°C.
Remover el crecimiento de cada tubo, con 3 mL de...
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