Revista De Biofisico

Revista Científica
ISSN 0798-2259 versión impresa

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Rev. Cient. (Maracaibo) v.16 n.2 Maracaibo mar. 2006download el artículo en el formato PDF |   |
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COMPOSICIÓN LIPÍDICA DE LA MEMBRANA MITOCONDRIAL INTERNA DEL MÚSCULO DE Ascaris suumLipidic Composition of Inner Mitochondrial Membrane from Ascaris suum

Evelin Rojas Villarroel 1, ZadilaSuárez de Mata2, Pedro Izquierdo Córser 1, Gabriel Torres Ferrari 1 y Aiza García Urdaneta1 1Laboratorio de Bioquímica, Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad del Zulia, Apartado 15252. Maracaibo, Venezuela. 
2Departamento de Biología Celular, Laboratorio de Bioquímica de Parásitos, Universidad Simón Bolívar.
Sartenejas, Venezuela. E-mail: evelinro@yahoo.com; zsuarez@usb.ve;izquier@cantv.netRESUMEN Las proteínas y los lípidos juegan un rol importante en la estructura y función de las membranas celulares y subcelulares. Diversos investigadores han estudiado acerca de los lípidos que componen la membrana mitocondrial de muchos organismos y han encontrado principalmente fosfolípidos (cardiolipina, fosfatidiletanolamina, fosfatidilserina) y colesterol. La composición lipídica de lamembrana mitocondrial interna (mmi) de ningún helminto se ha determinado hasta ahora. Ascaris suum, parásito helminto que habita el intestino delgado del cerdo y metaboliza los carbohidratos hasta ácidos grasos de cadena corta en condiciones anaeróbicas, ha sido utilizado como modelo en estudios de bioquímica comparativa. En este estudio, se aisló mediante centrifugación diferencial en sacarosa, lafracción mitocondrial del músculo de Ascaris y luego se separó la mmi por centrifugación en presencia de fosfato de potasio 10mM. La fracción de lípidos de la mmi fue extraída por el método de Folch y aplicada en cromatoplacas para Cromatografía en Capa Fina (CCF). Mediante ensayos enzimáticos para la determinación indirecta de colesterol y triacilglicéridos, y con CCF se encontró que colesterol,fosfolípidos y otro lípido no identificado, están presentes en la membrana interna de la mitocondria del parásito. La fracción de fosfolípidos separada por CCF fue extraída de la sílica gel con cloroformo: metanol: H2O (30:50:20) y analizada en Cromatografía de Gases (CG) para determinar su composición en ácidos grasos. Los ácidos oleico, palmítico, linoleico y esteárico se encontraron en: 8,38;7,98; 6,39 y 6,28%, respectivamente. Otros ácidos como el linolénico y mirístico, estaban en menor proporción (1,65 y 0,50%, respectivamente), similar a lo reportado en otras investigaciones referidas a la composición lipídica mitocondrial de otros organismos, lo que sugiere un papel importante de estos ácidos grasos para la función mitocondrial. Palabras clave: Colesterol, fosfolípidos, lípidos,membrana mitocondrial interna, mitocondria. |
que permitan controlar la infección.
MATERIALES Y MÉTODOS
Material biológico
Se utilizó Ascaris suum como animal de experimentación. Los helmintos fueron obtenidos del intestino delgado de cerdos procesados en los mataderos del Tuy (Santa Teresa de Tuy, Edo. Miranda) y de Caracas (carretera vieja de Los Teques, Edo. Miranda). Se mantuvieron ensolución salina isotónica durante su traslado al laboratorio y en un período no mayor de 24 horas se les extrajo el tejido muscular mediante disección en frío.
Aislamiento de la fracción mitocondrial
La fracción mitocondrial proveniente de 41,6 g de músculo de Ascaris se obtuvo por el método de centrifugación diferencial en sacarosa, según describe Saz y Lascure [23].
Obtención de la membranamitocondrial interna
Para obtener la fracción de membrana mitocondrial interna se utilizó una modificación del procedimiento descrito por Comte y Gantheron [7].
La fracción mitocondrial proveniente de 20 g de músculo del parásito se resuspendió en Buffer fosfato de K+ 10 mM, pH: 7,4 y se llevó a un volumen final de 4 mL, ésta se dejó por 20 minutos a 0°C. Se homogenizó y centrifugó a 105.000...