RM PRUEBA BIOQUIMICA

La prueba del rojo de metilo es una prueba cuantitativa de la producción de acido, que requiere que los microorganismos positivos, produzcan acidos fuertes como: láctico, acético, formico, de laglucosa a travez de la vida de fermentación acida mixta, manteniendo algunos el ph bajo aun después de la incubación prolongada, superando el sistema buffer del medio.
La validez de la prueba dependede una incubación lo suficientemente prolongada para permitir que ocurra la diferencia en el metabolismo de la glucosa Como indicador el rojo de metilo cumple un rango entre pH de 6 que genera coloramarillo y 4.4 rojo, detectando así pH mucho más bajos que otros indicadores, por lo tanto para que el microorganismo en estudio produzca un cambio de color, debe producir grandes cantidades de acidofuerte.
PROCEDIMIENTO
Sembrar un tubo de caldo MR/VP con un cultivo puro del microorganismo a probar.
Incubar 24 horas a 35°C
Agregar rojo de metilo
Leer reacción de inmediato
Dejar en reposo de10 a 15 minutos
CONTROL DE CALIDAD
Se debe hacer control positivo y negativo de la prueba después de la preparación de cada medio y reactivo.
Control positivo: Escherichia coli
Control negativo:medio sin microorganismo o enterobacter cloacae.

PRUEBA POSITIVA
Todos los miembros de la familia Enterobacteriaceae son por definición fermentadores de glucosa en el caldo MR/VP, pero después dela incubación de 18 a 24 hrs, la fermentación resultante produce derivados metabolicós ácidos, en consecuencia, en un comienzo todos los microorganismos entéricos darían una prueba positiva, sinembargo luego de la incubación requerida se puede diferenciar verdaderamente, pues los microorganismos positivos continuaran la fermentación de ácidos, manteniendo un ambiente ácido en el medio.
Producenacidos mas estables lo que mantiene una alta concentración de iones de hidrogeno hasta que alcanza cierta concentración cesando la actividad.






PRUEBA NEGATIVA
Los microorganismos rojo...