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RNA INTERFERENTE




MARITRINI MARCOS CABALLERO
CLARA ISABEL ROMERO POLO
7/03/2013


RNA Interferente
Contenido

1.Introducción y primeras evidencias………………………………………1

2. Biogénesis y mecanismo de acción de iRNA……………………….…2-4
2.1 Biogénesis y mecanismo de acción del siRNA
2.2 Biogénesis y mecanismo de acción del miRNA

3. Tipos iARN (iRNA) 4-6
3.1. siRNA ymiRNA
3.2. piRNA
3.3. scnoRNA
3.4 Otros iRNA

4. Futuras aplicaciones 7-16
4.1. RNA de interferencia: Biogénesis, mecanismos moleculares y sus
aplicaciones en cáncer cervical………………………………..…..7-13

4.2. Sistemas de liberación de siRNAs para el tratamiento del HIV. 13-16

5. Bibliografía 16




1-INTRODUCCIÓN


El RNA interferente (iRNA): Es una parte no codificante delgenoma (1,5-2%), de vital importancia.

Desde el descubriento del double strand RNA (dsRNA) que silenciaba genes en c.elegans y en plantas, el iRNA es una de las muchas claves para entender la regulación génica.

Su mecanismo ha sido conocido a través de organismos modelo, por silenciamiento génico post-transcripcional (degradar RNA), transcripcional, o por inhibición de la traducción.Organismos modelo:
-Plantas-> Petunia hybrida
-C. elegans
-Drosophila melanogaster
- En casos infecciosos, cáncer, neurológicos, cardiovasculares…


Primeras Evidencias

Organismos Modelo:
1 La evidencia más temprana de la existencia del iRNA fue descubierta en estudios de silenciamiento génico (casos transcripcionales y postranscripcionales) en plantas, en 1990.Richard Jorgensen intentó obtener un color violeta muy intenso en petunia hybrida, y para conseguirlo, se introdujeron varias copias del gen que codificaba para la enzima Chalcona sintasa.
Los genes que se introdujeron no se expresaron e inhibieron a los originales de la planta para esta enzimaCo-Supresión. En su lugar, obtuvo Petunias parcheadas o casi blancas.

2 Fire et al., en 1998, enC. elegans, observó que el dsRNA (RNA intereferente de doble cadena) tenía la capacidad de silenciar genes con secuencias homólogas a ese RNA.
Se inyectó RNA interferente dsRNA, el cual contenía la misma secuencia que el mRNA, al nematodo C.elegans.
Consecuencia:
Bloqueo de la síntesis de proteínas porque el RNA agregado interfiere en la expresión génica; A esto se le conoce como Interferenciadel RNA.

3 En Drosophila melanogaster, se introdujeron RNA interferentes de doble cadena largos (dsRNA largos).
Eran cortados en pequeñas secuencias específicas de doble cadena (21 nucleótidos donde encontramos 19 apareados y 2 en los extremos sin aparearse); A las secuencias resultantes se les llamaba siRNA (short).

4 En Humanos:
Los RNAi en eucariotas son específicos en: Tiempo yTejidos. Son de mucha importancia ya que se encuentran muy conservados.








2 .BIOGÉNESIS y MECANISMO DE ACCIÓN:

2.1 BIOGÉNESIS y MECANISMO DE ACCIÓN del siRNA:

Su síntesis comienza con la presencia de una cadena larga doble de RNA exógena (dsRNA), la cual pasa al citoplasma para ser procesada por diversos complejos proteicos. La primera enzima que actúa sobre la dsRNA es laDicer, una RNasa III citoplasmática dependiente de ATP que lleva a cabo una fragmentación de la dsRNA dando pequeños fragmentos de 21-25 nucleótidos con los 2 nucleótidos de los extremos libres, conocidos como siRNA (small RNA interference). Una vez obtenidos los pequeños RNA interferentes (siRNA) puede actuar sobre ellos la RISC (Complejo de Silenciamiento Inducido por RNA) la cual para poder ejercersu acción necesita asociarse a otras proteínas conocidas como Argonautas (Ago), unidas siRNA+ RISC+ AGO, se activa la actividad Helicasa de RISC y separa la hebra con sentido(5’->3’) quedándose unida a ella sólo la cadena antisentido (3’->5’) la cual va a permitir a RISC reconocer y unirse de forma específica al mRNA.



Unida la siRNA al mensajero permite que RISC ejerza sobre él distintas...