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FUNDAMENTOS
Por la estructura peptídica y la presencia de determinados grupos (grupos R), las
proteínas pueden reaccionar con una variedad de agentes originándose productos
coloreados. Estasreacciones son la base para la determinación cuantitativa y cualitativa
de las proteínas. Por presentarse variaciones en la composición de los aminoácidos de
las diferentes proteínas, se manifiestandiferentes colores y grados de intensidad para
una misma reacción, íntimamente relacionado con la naturaleza de la proteína
analizada.
1.1 Fundamentos químicos de las pruebas.
1.1.1 Prueba dela ninhidrina (Hidrato de tricetohidrindeno).
Todas aquellas sustancias que presentan al menos un grupo amino y uno carboxilo libre,
reaccionaran con la ninhidrina. La positividad se manifiestapor la aparición de un color
violáceo o amarillo. Debido a que las proteínas y los aminoácidos, poseen esta
característica, la reacción sirve para identificarlos. Algunas soluciones de amonio yaminas, dan la coloración característica, aparentemente debido a una oxidación y
reducción intramolecular de la ninhidrina en presencia de amoníaco. Los aminoácidos
porina e hidroxiprolina, que noposeen grupo amino sino imino (-NH-), dan un color
rojo que pasa rápidamente a amarillo. La reacción se muestra en la figura 1
27 Figura 1 Reacción de la prueba de la ninhidrina
C O
C O
C
O HO H
+
N C H
R
H
H
C OOH
Ninhidrina Aminoácido



C O
C O
C N C H
C OOH
R
R
C O
C O N
C
H
(BASE DE SCHIFF)
C
H
C
N C O
C O
C OOH
R



H2











H2
O
2 H2
O
+ CO2
C
O
H
(2-amino-1,3-dicetohidrindeno)
N H2
C
C O
C O
C O
C O
C
O H
OH
H
Ninhidrina
+
(2-amino-1,3-dicetohidrindeno)






2 H2O
C O
C O
C H N C
O C
O C(Ninhidrina-dicetohidrindeno)
color violeta
1.1.2 Prueba de Biuret
Es una prueba general para polipéptidos y proteínas ya que sirve para reconocer las
uniones peptidicas. La positividad se manifiesta por la...