salmonella


INVESTIGACION DE Salmonella EN ALIMENTOS

OBJETIVO

Conocer el fundamento de los medios de cultivo que se utilizan para el aislamiento de Salmonella a partir de alimentos
Identificar lascolonias de Salmonella en los distintos medios selectivos empleados
Aplicar la metodología para el aislamiento de Salmonella a partir de alimentos
Organizar e interpretar los resultados.


MARCOTEORICO



MATERIALES Y REACTIVOS

1
Matraz con 225 ml de caldo lactosado
1
Matraz con 125 ml de caldo selenito
1
Matraz con 125ml de caldo tetrationato
2
Placas petri con agar verdebrillante
2
Placas petri con agar Enterico de Hecktoen
2
Placas petri con agar Mac Conkey
1
Tubo con agar TSI
1
Tubo con agar LIA
1
Tubo con agar Citrato de Simmons

Alcohol al 70%
1
Tira deKit Api 20 E

Solución de yodo-yoduro

Solución de Cloruro Férrico

Etanol absoluto

Reactivo de Kovac

Parafina

Material para tinción de Gram
4
Mecheros
1
Incubadora
1
Balanzagranataria
1
Stomacher
1
Agitador de vidrio
1
Gradilla
1
Autoclave

METODOLOGIA

1. Pesar asépticamente 15 g de la muestra por duplicado en una bolsa para trabajar en homogeneizadorperistáltico (stomacher).
2. Adicionar 125 ml del medio de enriquecimiento selectivo estéril (caldo selenito y caldo tetrationato) y licuar si es necesario durante un min.
3. Transferir asépticamente lamezcla homogeneizada a un recipiente estéril de boca ancha con tapón de rosca.
4. Incubar de 18 a 24 h a 35°C; o, para alimentos fuertemente contaminados a 42°C por el mismo periodo de tiempo.
5.Trascurrido el periodo de tiempo agitar los matraces que contienen caldo selenito y caldo tetrationato y realizar el aislamiento en: Agar Entérico de Hektoen, Agar verde brillante y Agar Mac Conkey
6.Revisar la morfología colonial y verificar si existen colonias presuntivas de Salmonella
7. Identificación bioquímica. Realizar pruebas bioquímicas presuntivas, TSI, LIA y una confirmatoria Citrato...