salud

TÉCNICA PARA LA realizacion de prueba cruzada mayor ( en tubo)
II.8.1 Objetivo………………………………………………………………………………………………...........33
II.8.2 Alcance………………………………………………………………………………………………...33
II.8.3 Responsabilidad………………………………………………………………………………………33
II.8.4 Documento de Referencia…………………………………………………………………………..33
II.8.5 Operaciones Preliminares…………………………………………………………………………...33
II.8.6 Principio delProcedimiento………………………………………………………………………….34
II.8.7 Procedimiento…………………………………………………………………………………………34
II.8.8 Interpretación de los Resultados……………………………………………………………………35
II.8.9 Controles……………… TÉCNICA PARA LA realizacion de prueba cruzada mayor ( en tubo)



II.8

TÉCNICA PARA LA realizacion de prueba cruzada mayor ( en tubo)


II.8.1. OBJETIVO

Detectar anticuerpos irregulares en elsuero del receptor que vayan en contra de los G.R del donante

II.8.2. ALCANCE

Se realizara esta compatibilidad a todas las unidades que van a ser transfundidas.

II.8.3. RESPONSABILIDAD

El responsable de ejecutar este procedimiento será el profesional bioquímico que forme parte del equipo de trabajo de la sección de Inmunohematología, bajo la supervisión de la Jefe de Laboratorio.La Jefe de Laboratorio será responsable de supervisar la correcta ejecución de las técnicas laboratoriales y resolver discrepancias de resultados entre las técnicas utilizadas.
La persona responsable de la División de Calidad del Banco de Sangre, valiéndose de inspecciones periódicas y auditorias internas controlará el cumplimiento de lo establecido en este documento.
Será responsabilidad de laDirección y Administración de la Caja Nacionjal Salud, asegurar los materiales, insumos y reactivos necesarios para la realización de este procedimiento.

II.8.4. DOCUMENTOS DE REFERENCIA

Manual Técnico de la AABB.

II.8.5. OPERACIONES PRELIMINARES

Preparar el área de trabajo con el material a utilizar.
Atemperar los reactivos durante 20 minutos a temperatura ambiente.
Preparar lostubos de ensayo numerándolos y colocándolos de manera ordenada en las gradillas.
Preparar los cuadernos de registro de control de calidad diario y las hojas de registro de resultados.
Efectuar el control de calidad diario de los reactivos

II.8.6. PRINCIPIO DEL PROCEDIMIENTO

En la prueba cruzada Mayor el suero del receptor es enfrentado con las células del donante en varias fases.
Esimportante detectar anticuerpos irregulares en el suero del receptor que vaya en contra de los G.R. del donante, como también es importante para detectar errores de tipificación ABO.

II.8.7. PROCEDIMIENTO

1. Verificar los datos del tubo que contiene la muestra sanguínea, con la orden de transfusión para asegurarse que son los mismos.
2. Marcar los tubos con la letra ”M” y el númeroidentificador y otro tubo como autocontrol marcado AC
3. Colocar 100ul de suero o plasma de los pacientes, colocando igualmente a un tubo de autocontrol.
4. Lavar por 3 veces GR de las unidades a compatibilizar con solución salina al 0.9% y preparar una solución al 3 o 5 %
5. Agregar 50 ul de la suspensión de GR a su respectivo tubo donde están los 100 ul de suero.
6. Centrifugar por 1 min a1000rpm
7. Observar el sobrenadante desprendiendo suavemente el botón y reportar en cruces tubo en mano, si es negativo, continuar con el siguiente paso.
8. Agregar una gota de albúmina al 30% o dos gotas al 22% en cada tubo.
9. Incubar por 30 min a 37ºC
10. Cntrifugar 1 min a 1000 rpm
11. Repetir el paso 6
12. Lavar por 3 veces con solución salina al 0.9%, resuspendiendo el botón luego de cadalavada y decantar todo el sobrenadante en la ultima lavada.
13. Añadir una gota de reactivo de Coombs, mezclar suavemente, centrifugar por 1 min a 1000 rpm.
14. Leer suavemente el botón y reportar en cruces.
15. Si no hay presencia de aglutinación añadir de células control coombs .
16. Centrifugar a 3400 rpm por 15 seg y leer la formación de aglutinación ( 2+)
17. Si el control de coombs es...