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Illumina Genome Analyzer
Es una secuenciación por síntesis con terminadores reversibles, en donde el ADN de doble cadena es fragmentado en forma física o enzimática, a estos fragmentos se lesagrega adaptadores universales A y B , que son agentes desarrollados que permiten simplemente unirse a los extremos de estos fragmentos. Se reconoce a los extremos de estos fragmentos, básicamente por queestán rotos, en donde los adaptadores son capaces de reconocer esa anormalidad y se unen a ellos, o por que los sitios de restricción son conocidos, por lo tanto los adaptadores son complementarios aestos sitios de restricción. Estos adaptadores tienen la propiedad de simplemente unirse a una superficie solida, por lo que a esa superficie solida pueden unirse millones de hebras simples y tambiénadaptadores solos, ya que después en el mix completo cuando se vierte en la placa va de todo, van fragmentos que tienen correctamente sus dos adaptadores agachados, fragmentos que solo tienen unadaptador y que no se van a pegar en superficie y/o adaptadores solos, por lo tanto queda todo ese universo de cosas pegadas sobre esa superficie solida, entonces después por condiciones de T° , estosfragmentos unido a un adaptador ya sea A o B caen hacia la placa y cuando encuentran un adaptador opuesto a el (A o B) solo se unen a él, generando esa unión de puente y a partir de esa estructuraproducen una PCR y agregando bases hasta que terminan (proceso de bridge amplification) , luego de ese proceso cambian la T° y se transforman a doble hebra y comienza el ciclo de nuevo con el fin decumplir con el paso de la secuenciación que es amplificar la señal. Por lo tanto a partir de una hembra se forma un clusters o familias y luego la etapa de leer, en donde se tiene a esta familia que sonsecuencias clonadas de la misma y nuevamente la taq polimerasa va agregando bases, en el cual cada ves que sea agregada una esta fluorecen, ya que están marcadas fluoruro por lo que hay una señal de...