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El glicerol genera una diferencia enlas densidades, el lisis celular rompe los enlaces lipídicos, y el azul de bromo fenol permite la visualización del corrido.
3. Las muestras deben ser calentadas para denaturar por completo ylinealizar completamente las proteínas obtenidas.
a. Si no se realiza este procedimiento las proteínas al no ser denaturadas completamente al pasar por el gel, no corren exitosamente ya que las mallasde fibra de gel no permitirán su movimiento si no están completamente lineales. Por otra parte si se calienta la muestra por mucho tiempo la muestra se puede afectar y denaturar hasta un punto en elque termine en aminoácidos.
b. otra manera de denaturar una proteína es generando un cambio del pH, generalmente se hace acidificando la muestra, teniendo en cuenta que la diferencia de pH noafecte la integridad de la muestra.
Preguntas Teóricas Práctica 3
1. El primer paso es hacer una lisis celular por medio de detergente SDS. Con esto se consiguedejar todas las macromoléculas en solución. Es importante adicionar inhibidores de enzimas proteolíticas, debido a que estas pueden alterar la conformación de las proteínas que se quieren estudiardesfavoreciendo el objetivo de la proteomica. Luego de esta inhibición es importante separar las proteínas de las otras moléculas de las cuales no se está interesado y esto se debe realizar por medio dela solubilidad de las proteínas en solventes apolares aprovechando el hecho de que muchas poseen residuos que son altamente hidrofóbicos. La solvatación de las proteínas por parte de solventes...
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