Seminario inmunologia

SEMINARIO INMUNOLOGIA

1.Tipaje HLA: clase 1 clase 2
HLA 1 se Express en todas las celulas nucleadas y HLA 2 en todaslas celulnuceladas.

Baja resolucion
Alta resolucion a nivel de alelo
Se esta tipando el gen
La protein no se pine asterisco

1-Microlinfotoxicidad (serologia): cogemos celulas mononucleadas y la extracción de DNA.Se cuantificaria.
HLA de clase uno y se tipa el A y elB porque son los mas hetetogenicos, masrechazo.
Ac anti-A11
Complemento se une a la aprte constante del Ac.E complejo ataca a mb, lsiis celular y muerte.
Teñimos y observanos la muerte.
Ac anti-A 32: no se va a unir (porque no esta en la celula),no muerte, color verde con el colorante naranja de acridina.
La interpretación la hacemos con unas placas.
Split: Tengo una molécula 9 y dentro dela 9 hay dos tipos.El A23 y ek A24 comoparten una secuenci muy parecida.Aaber donde llegar y porque es asi.
2-Tipaje por biología molecular:
La clase 2 se hace por PCR.
Extracción DNA.
Cuantificacion DNA por espectofotometria.
PCR
Elextroforesis en el de azarosa
Transiluminador: Bormuro de etidio

El tiraje HLA se hace para los receptores esperantes de transplnte y los donantes sobre tdode riños y medula osea.A, B y DR son los mas polimorfitos, los qque se suelen hacer.A veces hacen el DQ, DQA y DQB.

Respuesta inmunitaria seminario


Cross-match miramos si un paciente tiene crossmatch con un paciente concreto.
-Citotoxicidad: cogemos linfocitos del donante: en la m estan moléculas HLA, los enfrentamos con suero del paciente.Si el paciente tiene Ac anti-B7, añadimoscomplemento, que se le unira y muere la celula.Si celulas vivas nungun Ac del suero del paciente s eha unido a ningun HLA del donante

-Citometria: mas sensible.Un paciente peude tener Ac a titulo bajo contra HLA del donante y sadra positiva.Añadimos anti-IgG fluorescente (se ha unido a algun Ac)citometro de flujo

Tecnicas:
Ac antiHla por citotxicidad: separamos linfocitos de 30 personas y hacemos30 crossmatches; enfretamos el suero del paciente con 30 personas dela comunidad.El PARA es con ke porcentaje de las celulas de este panel reacciona el paciente.Por citotoxicidad: muerte si muerte no.Poco sensible.Pero se usa de estandar.Sirve para saber con ke procenaje de posbles donantes reaccionaria el paciente.Un señor negativo muchas posibilidades de ke kn kualkier donante corssmatch seanegativo.No garantiza que no vaya a haber Ac anti HLA: PORQUE LA TECNICA NO ES MUY SENSIBLE Y PORQUE PEUDE SER QUE LAS 30 PERSONAS NO HAY NINGUN B57 UE ES RARO Y JUSTO ESE PACIENTE TIENE ANTIB57 (NO TENEMOS TODOS LOS DELA POBLACION, TENEMOS LOS MAS FRECUENTES)

-Tecnica luminex: tecnica definitiva.Citometro y utilizamos un panek de esferas fluorescentes recubiertas de HLAs.Cada esfera tiene HLAsde un solo tipo (ej:solo A1).Es muy sensible detecta cantidades minimas de Ac.Siel apciente es negativo estamoa seguros que no tiene Ac anti HLA cointra nada.
Todos los HLA estan ahí en la placa.
Nos permite tb como cada esfera tiene solo uno, identificar contea que HLAs concretos tiene Ac.
Esfera+ suero
Ac antiIgG con fluorrocromoy florescencia
Caso 1: para 43%-ANTI a2
CASO 2: 6.7%- ANTIB51
El resultado del luminex no es similar porque tienen mucho y uno contra una especificidad y el otro contra otro.Los dos tienen Ac contra una especificidad pero lepra es muy distinto porque el A2 es muy frecuente y de las tres personas todoas esas en rojo eran A2, en cambio ek B51 era menos frcuente y ese dia solo dos eran b51.
El PARA nos indica la situación del paciente: para con 43% menosproabilidades transplantarse cque un PARA de 7.
No es lo mismo tener Ac frente a un HLA que frente a otro, porque las frecuencias de los HLA son distintas.
No es lo mismo un kilo de Ac que unos poquitos.

El tiraje del 5: es la banda 7 y la anda 7 es dr4—verdad
El otro la 10, la 11 y la 21 es la 13
Recetor 5: hay que excluirlo pork tiene Ac frente al donante (contra b35 tiene 14000 y b35 es...