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 Seminario Nº5 251.208


Preguntas:

1.- En una preparación de mitocondrias de músculo esquelético se mide el consumo de NADH, el consumo de O2 y la producción de ATP, en presencia de DNP(dinitrofenol) y antimicina A. El DNP es un agente desacoplante que produce canales de H+ en la membrana mitocondrial interna. La antimicina A es un inhibidor específico del complejo III mitocondrial.Explique los resultados de las medidas realizadas en esta muestra de mitocondrias.


Cuando la adición es nada, la cadena transportadora funciona normalmente, por eso que el consumo de NADH es altoy eso se refleja en el alto consumo de oxigeno y a su vez una alta síntesis de ATP.

Cuando se adiciona DNP (dinitrofenol) la cadena transportadora pierde el gradiente de protones, ya que losprotones pasan directamente por la membrana interna y no por el complejo V. El efecto del DNP es aumentar el consumo de oxigeno en forma exagerada. Por lo tanto se consume más NADH que en una condiciónnormal y el consumo de oxigeno que representa la cadena trasportadora de electrones es muy alto. La síntesis de ATP disminuye ya que los protones del espacio intermembrana en lugar de pasar por elcomplejo V pasan directamente por la membrana interna.

Cuando se adiciona Antimicina, se produce una inhibición del complejo 3 y los electrones no pueden pasar desde el complejo 3 al 4, por lo tantose necesita menos NADH y se reera menor consumo de oxigeno, lo mismo que una baja de la síntesis de ATP

2.- Para estudiar el acoplamiento entre la cadena respiratoria mitocondrial y la fosforilaciónoxidativa se han utilizado dos compuestos artificiales, el DCCD (Diciclohexilcarbodiimida) y el DNP (Dinitrofenol). El DCCD es un compuesto que bloquea el canal de protones de la ATP sintasa mientrasque el DNP es un ionóforo de protones. Para estudiar su efecto se purificó mitocondria de hepatocitos de ratón y se midió el transporte de electrones a través de la cadena respiratoria y la...