Separación de fosfolípidos por cromatografía en capa fina y determinación de Colesterol en yema


Introducción
Los lípidos, son un grupo de compuestos químicamente diversos, solubles en solventes no polares (como cloroformo, tolueno o benceno), insolubles en agua y desempeñan diversas funcionesbiológicas importantes: como reserva energética, estructural (membranas celulares), reguladora, hormonal, transportadora, térmica, entre otras.
Se clasifican en simples y complejos. Los lípidos Loslípidos simples o esteroides son derivados del isopreno y no son saponificables. Entre ellos se encuentran el colesterol, hormonas sexuales, ácidos biliares y algunas vitaminas. El colesterol es uno delos esteroides más abundantes y se aísla de la extracción de casi todos los tejidos animales. Los complejos contienen ácidos grasos por lo que son saponificables.


Los lípidos, pueden ser separadosfácilmente de otras biomoléculas por extracción con solventes orgánicos y pueden ser separados por técnicas experimentales como la cromatografía de adsorción, cromatografía de placa fina ycromatografía de fase reversa.

Objetivos
•Separar e identificar los fosfolípidos de la yema de huevo por la Técnica de cromatografía en capa fina.
•Comparar las ventajas de esta técnica de separación con lacromatografía en papel.
•Determinar la concentración de colesterol presente en la yema de huevo por el método de Lieberman-Burchard

Resultados



Tabla1. Identificación de lípidos

Distancia delFrente
Distancia de la Muestra
Rf
Lípidos Identificados
Molibdato
5.4
0.9
0.166
Liso-fosfatidil-colina

5.4
1.9
0.35
Fosfatidil-colina

5.4
3.1
0.57
Fosfatidil etanol amina
Bismuto
5.7
1.5
0.26Liso-fosfatidil- colina

5.7
4.9
0.85
Fosfatidil-colina
Ninhidrina
5.9
0.8
0.13
Liso-fosfatidil-colina

5.9
1.2
0.2


5.9
1.4
0.23
Fosfatidil serina

5.9
3.4
0.57
Fosfatidil etanol amina
Yodo
5.7
0.9
0.15


5.71.4
0.25
Esfingomielina

5.7
1.8
0.3


5.7
3.3
0.57


5.7
5.0
0.84





Figura 3. Curva tipo que muestra la Absorbencia según la [Colesterol] de una solución estándar.

Cálculos
Ecuación de la...