Separacion de azul de metileno y fluoresceina

INTRODUCCIÓN.
La cromatografía es un método físico de separación en el que los componentes que se han de separar se distribuyen entre dos fases, una de las cuales está en reposo (fase estacionaria) mientras que la otra (fase móvil) se mueve en una dirección definida.
La cromatografía de adsorción es una de las técnicas mas empleadas para la separación de mezclas en sus componentes puros,purificación de un compuesto y comparación de compuestos que se creen idénticos, entre otras aplicaciones. Se puede llevar a cabo a través de diferentes modalidades: cromatografía en columna, en capa fina, en papel, etc. Se basa en el diferente grado de adsorción de cada compuesto sobre la superficie de una sustancia químicamente inerte denominada adsorbente, de modo que el compuesto se ve atraído azonas polares de la superficie del adsorbente por fuerzas electrostáticas, quedando reversiblemente logado a la misma. Para que el proceso ocurra es necesaria la presencia de un disolvente, o mezcla de disolventes que interaccionan con el adsorbente y los compuestos de la mezcla; esta interacción triple entre soluto, disolvente y adsorbente, establece las proporciones relativas en que se fijan ymigran, a través del adsorbente, los diferentes solutos y, por tanto, determina la separación entre los mismos.
RESULTADOS.
A493 volumen A668 volumen2
0 3 0 3
0.007 6 0 6
0.476 9 0 9
2 12 0.003 12
0.784 15 0.015 15
0.282 18 0.003 18
0.094 21 0 21
0.044 24 0 24
0.016 27 0 27
0.003 30 0 30
0.008 33 0 33
0.004 36 0 36
0.012 39 0 39
0.069 42 0.018 42
0.056 45 0.026 45
0.028 48 0.021 480.027 51 0.104 51
0.043 54 0.21 54
0.049 57 0.256 57
0.044 60 0.242 60
0.048 63 0.21 63
0.027 66 0.173 66
0.028 69 0.126 69
0.019 72 0.094 72
0.018 75 0.074 75
0.017 78 0.047 78
0.017 81 0.033 81



DISCUSIONES.
Los resultados interpretados en esta práctica fueron tomados del experimento realizado por otro equipo esto debido a que no se logró llevar a cabo de manera adecuada elexperimento propio ya que al momento de empacar la columna probablemente la base de lana de vidrio no fue la suficiente lo que permitía que la alúmina alcalina se traspasara demasiado lo que provocó que la columna se tapara.
Al realizar el perfil de elución de los datos obtenidos a partir de otro equipo, se puede observar que la separación de los colorantes fue exitosa ya que se tiene la formaciónde dos picos en la grafica, el primero corresponde a la elución de la fluoresceína ya que este colorante absorbe la luz a una longitud de onda de 493nm, por otra parte el segundo pico corresponde al azul de metileno puesto que este colorante absorbe la luz a una longitud de onda de 668nm.
También cabe mencionar que la separación de estos dos colorantes dependió de la polaridad de cada uno, en estecaso la fluoresceína es un compuesto polar por lo que al agregar agua, se establecieron interacciones débiles, como son de Van der walls y puentes de hidrógeno, que permitieron la elución de este colorante, mientras que el azul de metileno al ser un compuesto no polar quedó retenido en la superficie de la alúmina hasta la posterior adición de etanol ácido que al ser no polar permitió su elución.CONCLUSION.
Al finalizar la práctica se logró separar de manera adecuada la mezcla de colorantes por medio de una cromatografía por adsorción, además de construir un perfil de elución con el cual se pudo comprobar la separación de estos colorantes.
ACTIVIDADES.
1.- Especifique y defina los elementos del sistema cromatográfico para esta separación.
Fase estacionaria: se trata de un sólido oun líquido fijado en un sólido en el que los componentes de la mezcla a separar interaccionan de diferente manera con esta. En este caso la fase estacionaria fue alúmina alcalina en la que se llevo el proceso de adsorción.
Fase móvil: Consiste en un fluido que arrastra a la muestra a través de la fase estacionaria. Dependiendo de las propiedades de solubilidad de los componentes de la muestra...