Separacion de pigmentos de planta mediante cromatografia

SEPARACION DE PIGMENTOS DE PLANTAS MEDIANTE CROMATOGRAFIA EN PAPEL Y CAPA FINA
1. OBJETIVO

El objetivo de esta práctica es separar los componentes de una mezcla mediante dos técnicas diferentes.
2. INTRODUCCION
La cromatografía es una técnica utilizada para separar las diferentes sustancias de algún compuesto o mezcla.
Hay varios tipos de cromatografías, la usada en esta práctica es lacromatografía en papel.
En este tipo de técnicas hay dos fases:
La fase móvil: Es un fluido, en nuestro caso usaremos un líquido, pero también puede ser un gas o un fluido super crítico. También es denominado “eluyente”.
La fase estacionaria: Constituida por la muestra y el papel o placa en el cual se realizara la cromatografía.
La muestra se pone en el papel o placa donde se realizará lacromatografía, y ésta se coloca en vertical con el extremo donde se encuentra la muestra hacia abajo en un poco de eluyente sin llegar a cubrir ni siquiera la mitad del papel o placa. La fase móvil (eluyente) va ascendiendo por la fase estacionaria y arrastrando consigo las sustancias que forman el compuesto. Dependiendo de la afinidad del cada sustancia con e eluyente, cada una va ascendiendo másrápido o más lento, quedándose atrás o subiendo hasta donde llegue el líquido. Las más afines con el eluyente se adhieren antes a la fase estacionaria utilizada, en cambio, los menos afines se van desplazando, puesto que les cuesta más adherirse a ésta.
Para realizar una cromatografía correctamente debe realizarse varias pruebas parar elegir el eluyente correcto, puesto que no cualquier sustancia esigual afín con las sustancias que contiene la muestra a analizar.
Es importante que al introducir la capa fina o el papel el eluyente no rebase en altura la línea sobre la cual se ha aplicado la muestra.

Para calcular el Rf:



3. MATERIALES
Tubos capilares
Lada de vidrio
Papel de filtro
Placa calefactora
Tomate triturado
Éter de petróleo
Etanol 96%
Acetona
Solución deβ-caroteno
Vaso de boca ancha
Placa fina

4. CUESTIONES ANTES DEL EXPERIMENTO

La estructura de los principales pigmentos β-caroteno y licopeno se han mostrado en la introducción:
a) ¿Cuál es la diferencia básica entre las estructuras de estas dos sustancias?
El licopeno no tiene ciclohexenos en los extremos, puesto que los enlaces que cerraban el ciclohexeno pasan a formar un doble enlace, encambio, el β-caroteno si tiene los ciclohexenos en los extremos.
b) ¿Cuántos dobles enlaces hay en esas estructuras?
En la estructura del licopeno hay 13 enlaces dobles y en la estructura de β-caroteno hay 11 enlaces dobles.
c) ¿A qué clase de hidrocarburos pertenecen estos pigmentos?
El licopeno pertenece a los alifáticos, es un alqueno.
El β-caroteno es un aromático debido a que tieneciclohexenos en los extremos
5. PROCEDIMIENTO

Primero llevaremos a cabo la extracción de los pigmentos del tomate, esta se llevará a cabo en dos fases:
a) Pesamos 10 g de tomate triturado en un vaso de precipitado. Le añadimos 15 ml de etanol. Agitaremos la muestra con la ayuda de una varilla de vidrio. Una vez agitada la mezcla anterior la filtraremos colocando en el embudo una pequeña cantidadde lana de vidrio taponando la salida del embudo. Filtramos la mezcla sobre un matraz erlenmeyer. Con la espátula escurrimos la lana de vidrio. En esta fase tratamos de separar el agua y los componentes acuosos del tomate, que serán desechados.
El residuo de la lana de vidrio lo utilizaremos para extraer los pigmentos.

b) Pasamos el residuo a un vaso de 50 ml donde añadiremos 10 ml de éter depetróleo. Agitaremos la mezcla durante unos dos minutos. Volvemos a filtrar usando lana de vidrio como antes. La mezcla será filtrada sobre un vaso de precipitados. Una vez filtrada calentamos el vaso en una placa calefactora a una temperatura moderada. Finalmente nos quedaremos con una pequeña cantidad de disolución.
Una vez finalizada la extracción prepararemos la placa fina y el papel de...