Separación De Una Mezcla De Azul De Metileno Y Fluoresceína Usando Cromatografía Por Dsorción

VERIFICACIÓN DEL FUNCIONAMIENTO DE UN ESPECTROFOTÓMETRO
OBJETIVOS:
* Evaluará el rendimiento instrumental de un espectrofotómetro.
* Verificar la exactitud de la escala de la longitud de onda, la presencia de radiación dispersa, el ancho de banda, la exactitud fotométrica, la proporcionalidad de respuesta y el rendimiento global del instrumento.
DIAGRAMA DE FLUJO:
A) Exactitud de laescala de longitud de onda

A. 1) Método del filtro de tierras raras (didimio)

A. 2) Método de la solución estándar de NiSO4-6H2O al 20%

B) Propiedades fotométrica

C) Luz dispersa

D) Ancho de banda

E) Exactitud fotométrica
E. 1) Método de los filtros de transmisión
E. 2) Método de la solución de estándar de NiSO4 al 20%



F) Intervalo dinámicolineal de concentración

RESULTADOS:
A) Exactitud de la escala de longitud de onda
A. 1) Método del filtro de tierras raras (didimio).

Tabla 1. Espectro de transmisión del filtro de didimio.
Longitud de onda (nm) | %T |
400 | 14.4 |
410 | 26.4 |
420 | 40.6 |
430 | 50.2 |
440 | 55.4 |
450 | 49.8 |
460 | 44.8 |
470 | 46 |
480 | 46.2 |
490 | 44 |
500 | 46.8 |
510 |55.4 |
520 | 53.6 |
530 | 39 |
540 | 29.2 |
550 | 29.6 |
560 | 44 |
570 | 63.2 |
580 | 55.6 |
590 | 30.4 |

570 nm
570 nm
540 nm
540 nm
510 nm
510 nm
470 nm
470 nm
440 nm
440 nm

Gráfica 1. Espectro de transmisión de didimio

A. 2) Método de la solución estándar (NiSO4 6H2O al 20%)

Tabla 2. Espectro de transmisión de la solución de NiSO4 6H2O al 20%
Longitudde onda (nm) | %T |
380 | 15 |
390 | 5.4 |
400 | 2 |
410 | 2 |
420 | 2.6 |
430 | 3.8 |
440 | 7.4 |
450 | 17 |
460 | 30 |
470 | 44.2 |
480 | 53.4 |
Longitud de onda (nm) | %T |
490 | 65 |
500 | 75 |
510 | 84 |
520 | 85.8 |
530 | 85.4 |
540 | 82.6 |
550 | 79 |
560 | 74.4 |
570 | 71 |
580 | 65.6 |
590 | 59 |

Valor máximo de %T
Valor máximo de %TGráfica 2. Espectro de transmisión de la solución de NiSO4 6H2O al 20%.

B) Proporcionalidad fotométrica

Tabla 3. Proporcionalidad entre A y  para NiSO4 6H2O al 20%
Longitud de onda (nm) | Absorbancia |
530 | 0.068 |
540 | 0.083 |
550 | 0.102 |
560 | 0.128 |
570 | 0.148 |

Gráfica 3. Proporcionalidad entre A y para NiSO4 6H2O al 20%.
Mediante mínimos cuadrados:
a =-1.02 b = 2.05x10-3 r2= 0.991

E) Exactitud fotométrica

E. 2) Método de la solución estándar de NiSO4 6H2O al 20%

Tabla 4. Exactitud fotométrica. Método del NiSO4-6H2O al 20%
Longitud de ondaParámetro | 400 nm | 510 nm |
Absorbancia esperada | 1.78 | 0.088 |
Tolerancia aceptada | | |
Absorbancia medida | 1.580 | 0.080 |

F) Intervalo dinámico deconcentración

Tabla 5. Intervalo dinámico de la concentración.
Tubo | Concentración de NiSO4-6H2O (M) | A420 |
A | a’ | | Serie a | Serie b |
1 | 1´ | 0 | 0 | 0 |
2 | 2’ | 0.009 | 0.127 | 0.100 |
3 | 3’ | 0.028 | 0.239 | 0.234 |
4 | 4’ | 0.066 | 0.542 | 0.542 |
5 | 5’ | 0.104 | 0.766 | 0.776 |
6 | 6’ | 0.142 | 1 | 0.975 |
7 | 7’ | 0.152 | 1.025 | 1.010 |
8 | 8’ | 0.171 | 1.120| 1.110 |
9 | 9’ | 0.180 | 1.130 | 1.120 |
10 | 10’ | 0.19 | 1.190 | 1.180 |

Gráfica 4. Curva de calibración de NiSO4.

Tabla 6. Resumen de resultados de evaluación del funcionamiento del espectrofotómetro.
Parámetro Estudiado | Valores de referencia | Valores Experimentales | Conclusión |
Exactitud de la escala de longitud de onda1.Filtro de didimioMáximos (nm)Mínimos(nm)2.Solución de NiSO4 al 20%Máximos (nm)Mínimos (nm) | 550580500380-400 | 570400520400-410 | La exactitud de la escala de longitud de onda se encuentra en buen estado ya que se cumple en ambos métodos dentro de la escala aceptada. |
Proporcionalidad FotométricaDatos de regresión de 530 a 570 nm | | a= -1.02b= 2.05x10-3 | |
Luz dispersa%T a 420 nm (solución de NiSO4 6H2O al 20%)%T a 450...