Sexando esperma del toro

In: Topics in Bull Fertility, P. J. Chenoweth (Ed.)
Publisher: International Veterinary Information Service (www.ivis.org), Ithaca, New York, USA.

Sexando esperma del toro ( 24-Jun-2000 )
D. L. Garner1 and G. E. Seidel Jr2
XY, Inc., Animal Reproduction and Biotechnology Laboratory, Colorado State University Foothills Research Campus, Fort
Collins, Colorado, USA.
College of VeterinaryMedicine and Biological Sciences, Colorado State University, Fort Collins, Colorado, USA

Traducido por: C. Jiménez Escobar, Departamento de Ciencias de la Salud Animal, Area Teriogenología, Facultad de
Medicina Veterinaria y de Zootecnia, Universidad Nacional de Colombia., (7-May-2002).

Sexando el esperma del toro
El sexo de los terneros puede ahora ser predeterminado con una precisión del 85- 95% [1,2]. Esto se realiza separando el
esperma con un citómetro de flujo/clasificador de células. Esta técnica, que fue desarrollada para esperma vivo por el Dr.
Larry A. Johnson en el USDA Betsville Agricultural Research Center, está patentada [3-6] y licenciada exclusivamente a
nivel mundial para mamíferos no-humanos a la compañía privada XY, Inc. Esta compañía ha invertidoconsiderablemente
para avanzar esta tecnología a tal punto que se ha convertido en una realidad comercial [7,8].
Proceso del sexaje del esperma
El semen puede ser sexado porque el esperma-X, que produce terneras, contiene 3.8% más ADN que el esperma-Y, que
produce los terneros machos [5]. El esperma recién colectado es teñido con un colorante de bisbenzimidazol, Hoechst 33342,
que se fija de maneraespecífica al ADN por una hora, [9]. El esperma teñido fluorece azul brillante cuando es expuesto a un
rayo láser de onda corta. El esperma-X teñido emite una fluorescencia más brillante que el esperma-Y por su mayor
contenido de ADN. Esta diferencia en emisión de fluorescencia puede ser medida por un tubo fotomultiplicador (PMT) e
integrada usando una computadora potente para que el contenido del ADNde la mayoría, pero no de todo el esperma pueda
ser precisamente determinado a medida que pasan por el PMT en una corriente de fluido. A medida que la corriente de fluido
conteniendo el esperma sale por la boquilla del clasificador, éste es vibrado a alta frecuencia causando la formación de gotas
individuales a una tasa aproximada de 90 000/seg [9]. A pesar de que no todas las gotas contienenesperma, a aquellas que si
lo contienen se les da una carga positiva o negativa, dependiendo de la información sobre el contenido de ADN que fue
proporcionada por el detector. El esperma debe estar orientado apropiadamente para que el contenido de ADN sea medido
con precisión [5]. No se aplica carga a las gotas que contienen más de un esperma, esperma muerto detectado por la toma de
colorantevital, o aquellos espermas cuyo contenido de ADN no puede ser determinado con precisión, permitiendo
simplemente que estas células sean eliminadas como desecho. Las gotas cargadas conteniendo esperma-X, que han sido
cargadas negativa- o positivamente de acuerdo a su contenido de ADN, son desviadas por una placa cargada opuestamente
dirigiendo así el esperma hacia un vaso colector. Las gotasconteniendo el esperma-Y son simultáneamente dirigidas a un
vaso colector diferente al aplicar una carga opuesta a esas gotas para que así el esperma sea desviado hacia una placa de carga
opuesta. De esta manera, las gotas conteniendo el esperma-X, el esperma-Y o no esperma o demasiado esperma son
colectadas en tres vasos diferentes. Este proceso permite sexar y colectar el 40% del esperma que pasaa través del
seleccionador a una velocidad aproximada de 100 km/h. Por consiguiente, a un tasa de 20 000 espermas totales/seg, casi 4
000 espermas vivos/seg de cada sexo pueden ser seleccionados simultáneamente [9]. El sistema actual puede producir
aproximadamente 10 a 13 x 106 espermas vivos/h de cada sexo con un 85 - 90% de precisión.
Inseminación de dosis baja - El proceso de selección...