sfsfrer

Materiales y Método:

(*)Preparación y fraccionamiento de la muestra:
Se cortó con tijeras el hígado de pollo , se lavó múltiples veces con suero fisiológico después se puso en una maquina UltraTurrax para finalmente filtrar la muestra a través de una gasa en un embudo de vidrio. Como resultado de este proceso se obtuvo 7ml de Homogenizado Crudo (HC) el cual se nos entregó en un tubo Falconque se dejó en un vaso precipitado con hielo, se sacó 1ml de HC y se puso en un tubo Eppendorff . El tubo Falcon con ahora 6ml de HC se puso por 5 minutos en una centrifugadora (especial para estetipo de tubos) a 200rpm como resultado se separó la muestra inicial en pellet1 y sobrenadante1 con una pipeta Pasteur se sacó el sobranadante1 y se dejó en otro tubo Falcon mientras que al tubo con elpellet1 se le agregó 2ml de suero fisiológico y se agitó para que quedara en solución.
Del tubo que contenía el sobrenadante1 se sacaron 2ml y se pusieron en 2 tubos Eppendorff ,1ml por cada tubo,para luego ponerlos por 10 minutos en una centrifugadora(distinta a la que se usó con el tubo Falcon)a 13.000rpm, al terminar la centrifugación en cada tubo Eppendorff se había separado la muestra enpellet2 y sobrenadante2. Con una micro pipeta se dejaron en un tubo Eppendorff los sobrenadantes 2 y en otro los pellet2 , al tubo con los pellet2 se le agregaron 500 micro litros de suero fisiológico.Al terminar todo este proceso se obtuvieron un tubo Eppendorff con 1ml de HC , un tubo Falcon con pellet1(P1) en solución, un tubo Falcon con sobrenadante1(SN1), un tubo Eppendorff con pellet2(P2) ensolución y otro tubo Eppendorff con sobrenadante2(SN2),todos estos tubos se dejaron enfriando en hielo para su posterior uso.

(*)Actividad 1: Consistió en la detección de mitocondrias a través desu respectivo marcador molecular(enzima Succinato deshidrogenasa). Se utilizaron 6 tubos Eppendorff a cada uno se le agregó con una micropipeta 400µL de succinato,100µL de azul metileno y 400µL de...