Siembra En Medio Líquido

INTRODUCCIÓN

Generalmente las bacterias son inoculadas o introducidas en medios líquidos (caldos) o solidificados con agar para su propagación y/o conservación, así como para estudiar sus características de crecimiento. Es importante recordar que la inoculación de los microorganismos en los medios de cultivo, siempre deberán realizarse en zona aséptica (cerca del mechero o en campana de flujolaminar), condiciones que limitan la presencia de microorganismos indeseables o contaminantes.
En la transferencia de microorganismos, se emplean agujas, asa de inoculación, hisopos, pipetas o pipetas Pasteur que deberán esterilizarse previamente.
Las técnicas de aislamiento, permiten la obtención de microorganismos a partir de muestras complejas (suelo, agua, alimentos, etc) en las que hay unagran diversidad microbiana, así como para comprobar la pureza de los cultivos obtenidos. Los cultivos puros están formados por un solo tipo de microorganismo; y son indispensables para conocer las características morfológicas, propiedades de tinción, actividad bioquímica, patogenicidad, sensibilidad a antibióticos e identificación de las especies microbianas.
La utilización de estos dispositivosasí como de los diferentes medios de cultivo tienen aplicaciones específicas por ejemplo los medios líquidos se preparan en tubos o matraces que se cubren con tapones de algodón o tapas especiales.

OBJETIVOS
Mediante ésta práctica el alumno logrará:
* Identificar y describir correctamente las características en un medio líquido
* Aplicar la técnica adecuada para preparar el área detrabajo y evitar contaminaciones.
* Manipular adecuadamente los cultivos puros.
* Organizar e interpretar los resultados del estudio microscópico y macroscópico de bacterias.
FUNDAMENTO
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y presión de oxígeno adecuadas, así como un gradocorrecto de acidez o alcalinidad. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo microorganismo contaminante.
Existen diferentes clasificaciones de medios de cultivo. Una de ellas es según su consistencia (líquido, sólido y semisólido). En ésta práctica únicamente nos enfocamos al medio de cultivo líquido.
Éstos medios sedenominan caldos y contienen los nutrientes en solución acuosa. Un cultivo líquido puede ser transferido a través de distintos dispositivos, el inoculo se deposita dentro del caldo o medio líquido presentado un desarrollo microbiano particular que se manifieste en la superficie o a través de todo el líquido.
Los medios de cultivo líquidos se emplean fundamentalmente para:
- Cultivar losmicroorganismos y obtener grandes cantidades de los mismos o bien la producción de metabolitos específicos.
- Estimular y promover la selección de algún o algunos microorganismos e impedir que otros se multipliquen.
- Identificar al microorganismo estudiado mediante pruebas bioquímicas.
Caldo nutritivo
Medio de cultivo utilizado para propósitos generales, para el desarrollo de microorganismos con escasosrequerimientos nutricionales.
Su uso está descripto en muchos procedimientos para el análisis de alimentos, aguas y otros materiales de importancia sanitaria.
Es un medio no selectivo, de color ámbar claro que contiene pluripeptona y extracto de carne que constituyen la fuente de carbono y nitrógeno necesarios para el adecuado desarrollo bacteriano.
La siembra de éste medio se realiza porinoculación directa a la muestra o del microorganismo en estudio.
Fórmula (en gramos por litro) | Instrucciones |
Pluripeptona | 5.0 | Emplear 8 g de polvo por litro de agua destilada. Si es necesario, calentar hasta disolver. Distribuir y esterilizar en autoclave a 118-121°C durante 15 minutos. |
Extracto de carne | 3.0 | |
Puede ser utilizado además, como preenriquecimiento en la búsqueda...