Siembra y aislamiento de microorganismos a partir de Muestras Fecales y de Manipuladores

Nutrición y
dietética

Siembra y aislamiento de microorganismos a partir de Muestras Fecales y de
Manipuladores.

NOMBRE: Karina Riquilme
Camila Serrano
Paula Ríos
CARRERA: Nutrición y Dietética
ASIGNATURA: Microbiología y Parasitología.
PROFESOR: Mónica Riffo.
FECHA: 15- 10-201

Índice:

Introducción…………………………………………………………. Página 2

Desarrollo experimental…………………………………………Páginas 4Resultados…………………………………………………………Página 7

Toma de muestras de manos……………………………………. Página 7
Toma de muestras de fecales……………………………………. Página 8

Conclusión……………………………………………………………. Página 9

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Introducción:
En este laboratorio realizamos a cabo una siembra de los distintos tipos de
microorganismos s en diferentes medios de cultivo selectivos en los cuales
podremos diferenciar muestras de manos y fecas, sin embargoesto nos
permitió descubrir la presencia
de
enfermedades e infecciones,
microorganismos tales como Staphylococcus aureus, Escherichia coli,
Salmonella, entre otros.
Los microorganismos existen normalmente en diferentes regiones de
nuestro cuerpo y estas poblaciones representan lo que se conoce como flora
nativa o normal, con esto nos referirnos a aquellos microorganismos que
habitualmenteencontramos sobre la superficie o en el interior del cuerpo de
las personas sanas, a diferencia de la flora transitoria la cual está formada
por microorganismos patógenos hospedados por días o más tiempo.

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Desarrollo experimental:
Materiales y reactivos:
Hisopos de algodón, suero fisiológico, asas de siembra, tubos de ensayo,
placas Petri con medios de cultivo tales como Agar Nutritivo, Agar McConkey, Agar XLD, Agar Baird-Parker, estufas de incubación.
Toma de muestra de manipuladores:
‐ La toma de muestra de las manos de los manipuladores se realiza para
detectar portadores de Staphylococcus aureus tanto en manos como en
cavidad naso-faríngea.
‐ Esta técnica de toma de muestra puede utilizarse para detectar otros
microorganismos en manipuladores, como E. coli o coliformes fecales
en manos.Método de toma de muestra de manos:
‐ Humedecer el hisopo en el suero fisiológico y pasar sobre la palma de
la mano haciendo rotar el hisopo
‐ Lavar el hisopo en el suero fisiológico, drenar el exceso de líquido en
la pared del tubo.
‐ Lavar la zona entre los dedos, repetir la limpieza del hisopo y pasar el
hisopo entre las uñas.
‐ Finalizando el lavado quebrar el hisopo en el lugar donde setomó,
dejando caer la porción con algodón dentro del tubo.
‐ Repetir la misma operación para la otra mano.
‐ Ambos hisopos se colocan en el mismo tubo, es decir se consideran
una sola muestra.
Siembra para S. aureus:
1. Agitar fuertemente el hisopo en el tubo con el suero fisiológico.
2. Sembrar en la superficie de cada una de las 2 placas con Agar Baird
Parker (con telurito y lecitina) 0,1 ml dellíquido del lavado, esparciendo con
asa de Drigalsky.
3. Incubar las placas en posición invertida a 35-37 ºC durante 48 horas.
4. Elegir las placas que contengan entre 20 y 200 colonias aisladas y contar
todas las colonias que muestren las dos reacciones características
diagnósticas de lipólisis y proteólisis: se producen halos y anillos
característicos de margen estrecho y blanco (por precipitación desales de Ca
y Mg, por los ácidos grasos liberados) y que aparezcan rodeadas por zonas
claras (por reducción de la lecitina) que contrastan con la opacidad del
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medio. y, debido a la reducción del telurito a teluro, se desarrolla una
colonia negra.
5. La reacción con la yema del huevo y la reducción del telurito se presentan
con notable paralelismo con la coagulasa-positividad.
6. Llevar a cabola prueba de coagulasa con un número significativo de
colonias sospechosas de corresponder a S. aureus (no menos de 5).
Siembra para Coliformes:
1.
Repetir el paso 1 y 2 de la siembra anterior, pero sembrar en Agar Mc
Conkey
2.
Incubar por 48 hrs., a 35 - 37 ºC.
3.
Después de la incubación registrar aquellas colonias lactosa positivas y
lactosa negativas, siendo las primeras de color...