Simbra Y Aislamiento De M.O

ACTIVIDAD EXPERIMENTAL N° 1

“TECNICAS DE SIEMBRA Y AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS”

OBEJETIVOS
* Identificar materiales empleados en la práctica microbiológica
* Manejar en forma apropiada los materiales y cultivos microbianos
* Operar los métodos de esterilización en los determinados materiales
* Preparar medios de cultivos estériles en placas y tubos de ensayos
*Practicar diferentes tipo de siembra de microorganismos en forma aséptica
* Realizar aislamiento de bacterias en placas de agar nutritivo

ANTECEDENTES BIBLIOGRÁFICOS
El laboratorio de microbiología representa, a diferencia de otras ramas de la Biología prerrequisito imprescindible para su desarrollo como ciencia, inventos como: el microscopio, los medios de cultivo, tinciones, pruebas yrecuentos entre otros, han sido pilares en el desarrollo de la microbiología, es por esta razón que es tan importante comprender los procedimientos básicos en la técnica del manejo de los microrganismos para lograr un buen aprendizaje de la microbiología. (Toro, 2005)
Los microrganismos son ubicuos, por lo que la preparación de un cultivo puro implica no sólo el aislamiento de un determinadomicrorganismo a partir de una población microbiana natural mixta, sino también el mantenimiento del individuo aislado y de su descendencia, en un ambiente artificial al que se impide el acceso de otros microrganismos. Los microrganismos no requieren mucho espacio para su desarrollo; de ahí que pueda crearse un ambiente artificial dentro de los confines de un tubo de ensayo, de un matraz o de una placa dePetri, los tres tipos de recipientes más comúnmente utilizados para cultivar microrganismos. El recipiente de cultivo debe estar inicialmente estéril y después de la introducción del tipo de microrganismo deseado debe estar protegido de una posterior contaminación externa. Además esta contaminación puede introducirse al interior del matraz ó tubo cuando se abre para introducir o retirar elmaterial. Este peligro se reduce al mínimo pasando el orificio por la llama de un mechero, inmediatamente después de retirar el tapón y de nuevo, justo antes de volverlo a colocar. (Stanier, 1992)
El inóculo (material microbiano para sembrar o inocular un recipiente de cultivo) se introduce generalmente con un hilo de metal o asa que es rápidamente esterilizada en una llama, inmediatamente antes de serutilizada. La transferencia de cultivos líquidos puede hacerse también con pipetas. Para este fin, el extremo de la pipeta por donde se aspira se tapona con algodón y la pipeta se esteriliza envuelta en papel que mantiene tanto la superficie interna como la externa libres de contaminación hasta el momento de su utilización. (Stanier, 1992)
La manera más fácil de obtener cultivos puros de losmicrorganismos que forman colonias discretas sobre medios sólidos (como por ejemplo, la mayoría de las bacterias, levaduras, muchos hongos y las algas unicelulares) se lleva a cabo utilizando una de las modificaciones del método de siembra en placa. Este método implica la separación e inmovilización de los organismos particulares sobre o dentro de un medio nutritivo solidificado por agar ó algún otroagente gelificante adecuado. Cada organismo viable da origen, al multiplicarse, a una colonia de la cual pueden hacerse transferencias fácilmente. (Stanier, 1992)
La siembra por estría es, en general, el método más útil de sembrar en placa. Un alambre con un aro en la punta (asa de cultivo) se esteriliza e introduce en una suspensión, convenientemente diluida, de organismos y se utiliza luegopara hacer una serie de estrías paralelas, no superpuestas, sobre una placa de agar previamente solidificada. El inoculo se va diluyendo con cada estría sucesiva, de tal manera que si las estrías iniciales proporcionan un crecimiento confluente, a lo largo de las últimas estrías se van desarrollando colonias bien aisladas. (Stanier, 1992)
El sistema más sencillo de aislamiento en medios líquidos...