Sistema Api20E

API 20E
La batería de pruebas API20E es un sistema de identificación rápida para bacterias de la familiaEnterobacteriaceae y otras bacterias Gram (-). Básicamente consta de 21 tests bioquímicos estandarizados y miniaturizados y una base de datos. Este sistema presenta las ventajas de ser rápido, eficaz y de permitir realizar numerosas pruebas a la vez. Cada tira de API 20E contiene 20 microtuboso pocillos con distintos sustratos deshidratados. Cada tubo es una prueba bioquímica distinta.

Los microtubos se inoculan con una suspensión de microorganismos, en agua o solución salina, que rehidrata los medios. Las tiras o galerías se incuban a 37°C y por efecto del metabolismo bacteriano se producen cambios de color espontáneos o bien por la adicción de reactivos.

La lectura de lasreacciones se hace mediante comparación con una tabla de lectura donde se indica si los microorganismos deben considerarse positivos o negativos para cada reacción según el color aparecido.
A. Batería de pruebas incluidas y tablas de lectura con coloraciones positivas y negativas
Pueba | Reacción / Enzimas | Negativo | Positivo |
ONPG | beta-galactosidasa | sin color | amarillo |
ADH | argininadeshidrolasa | amarillo | rojo o naranja |
LDC | lisina descarboxilasa | amarillo | rojo o naranja |
ODC | ornitina descarboxilasa | amarillo | rojo o naranja |
CIT | utilización del citrato | verde | azul oscuro o turquesa |
H2S | producción de H2S | sin precipitado negro | precipitado negro |
URE | ureasa | amarillo | rojo o naranja |
TDA | triptófano desaminasa | amarillo |marrón-rojo |
IND | producción de indol | amarillo | color rosa o anillo rosa-rojo |
VP | producción de acetoína (Voges-Proskauer) | sin color | rosa-rojo |
GEL | gelatinasa | sin difusión | difusión de pigmento |
GLU | fermentación/oxidación de glucosa | azul o verde | amarillo |
MAN | fermentación/oxidación de manitol | azul o verde | amarillo |
INO | fermentación/oxidación de inositol |azul o verde | amarillo |
SOR | fermentación/oxidación de sorbitol | azul o verde | amarillo |
RHA | fermentación/oxidación de ramnosa | azul o verde | amarillo |
SAC | fermentación/oxidación de sacarosa | azul o verde | amarillo |
MEL | fermentación/oxidación de melobiosa | azul o verde | amarillo |
AMY | fermentación/oxidación de amigdalina | azul o verde | amarillo |
ARA |fermentación/oxidación de arabinosa | azul o verde | amarillo |
OX | citocromo oxidasa |   |   |

B. Etapas del procedimiento
Preparación de la suspensión bacteriana
Tomar una colonia bien aislada de cada microorganismo y resuspenderla homogéneamente en 5 mL de solución salina (1% de NaCl) o 5 mL de agua estéril.
Siembra de la galería API
Cada pocillo tiene un tubo y una cúpula (parte aerobia)
Llenarcon la suspensión de bacterias los tubos, no la cúpula, de todos los pocillos.
Llenar la cúpula de los pocillos CIT , VP, GEL con la suspensión de bacterias.
Tapar con parafina líquida
Llenar con parafina las cúpulas de los pocillos ADH, LDC, ODC, URE, H2S para obtener anaerobiosis.
Poner la galería en su propia cámara húmeda de incubación
Poner la tira en su propia cámara húmeda deincubación. Previamente poner agua en los alvéolos de la cámara para proporcionar una atmósfera húmeda durante la incubación.
Incubación en estufa
Incubar a 37 °C durante 18-24 h.
Anotar los resultados inmediatos
La lectura de los resultados se lleva a cabo por comparación de los colores de cada pocillo con los de las tablas de lectura.
Y anotando el resultado como positivo o negativo
Revelado depruebas que requieren reactivos
Para la lectura se tienen en cuenta los siguientes criterios:
* Si la glucosa da negativo y los tests positivos son 2 o menos de 2, no hay que añadir reactivos. Cuando ésto ocurre se hacen otros tipos de API como el API 20NE, API OF, el API M o el API 10S para ver determinados metabolismos especiales.
* Si la glucosa es positiva y/o 3 o más tests son...