Sistema cardiovascular

Cromatografía de Intercambio iónico
Fundamento:
La cromatografía de intercambio iónico se refiere a los métodos modernos para separar y determinar iones en columna con baja capacidad de intercambio iónico. Es un proceso que permite la separación de iones y moléculas polares basado en las propiedades de carga de las moléculas. Puede ser usada en casi cualquier tipo de molécula cargada,incluyendo grandes proteínas, pequeños nucleótidos y aminoácidos. La solución que debe inyectarse es usualmente llamada "muestra" y los componentes separados individualmente son llamados analitos. Es usada a menudo en purificación de proteínas, análisis de agua o control de calidad.
Técnica
Una muestra es introducida, de forma manual o con autosampler, dentro de un ciclo de muestras de volumen conocido.Una solución buffer acuosa conocida como fase móvil del bucle a la columna que contiene alguna forma de material en fase estacionaria. Esto es típicamente una resina o matriz de gel que consiste en agarosa o celulosa unido a grupos funcionales cargados. Los analitos objetivo (aniones o cationes) son conservados en la fase estacionaria pero pueden ser eliminados incrementando la concentración deespecies de similar carga que pueden desplazar los iones analitos de la fase estacionaria. Por ejemplo, en la cromatografía de intercambio catiónico, los analitos cargados positivamente pueden ser desplazados agregando iones de sodio cargados positivamente. Los analitos de interés pueden entonces ser detectados de varias maneras, típicamente por conductividad o por absorción de luz UV/Visible.
Paracontrolar un sistema CI, usualmente es necesario un Sistema de Datos Cromatográficos (Chromatography Data System, CDS). Además de los sistemas CI, algunos de estos CDS también pueden controlar sistemas de cromatografía de gas y HLPC.
Aplicaciones
• Medición de la hemoglobina
• Extracción y purificación de ácidos nucleicos
• Purificación de agua
• Purificación del fibrinógeno de la leche
•Determinación de pesticidas
• Identificación de ácidos orgánicos en la fruta y en el jugo
• Determinación de metabolitos de triptofan en el cordon umbilical
• Análisis clínicos



Ventajas
• Alta capacidad
• Alta resolución
• Con una misma columna se puede utilizar a diferentes pH y obtener diversos perfiles de elución.

Desventajas
• Las muestras deben de serdesnaturalizadas antes de ser aplicadas a esta cromatografía.










Cromatografía de Reparto
Fundamento
La cromatografía de reparto es hoy en día el método más utilizado. La cromatografía de reparto se divide en “fase normal”, y “fase reversa”, cuyas principales diferencias radican en las distintas polaridades de sus fases estacionarias y móviles.

*Cromatografía en fase reversa:
En lacromatografía de fase reversa su fase estacionaria en apolar, y la fase móvil polar. Las fases estacionarias han sido obtenidas haciendo reaccionar químicamente los centros silanoles activos de la sílice con un trialquilclorosilano.
La retención se produce en esta especie de capa líquida depositada químicamente como consecuencia de la distinta solubilidad relativa entre la fase estacionaria(apolar) y la fase móvil (polar).
Los compuestos más retenidos son los más apolares. La retención y selectividad se controlan fundamentalmente con la composición de la fase móvil. Para obtener una fase móvil de fuerza de elución óptima, se ensayan mezclas de metanol, acetonitrilo o tetrahidrofurano en agua.


Actualmente, el 75% de los análisis con HPLC se realizan en fase reversa. Permite unanálisis directo de muestras acuosas y de compuestos solubles en agua o en disolventes relativamente polares (metanol) y con peso molecular no superior a 2000 o 3000 ua.
Si se compara con la de adsorción, su comportamiento cromatográfico es excelente.


*Cromatografía en fase normal:

En esta cromatografía a diferencia de en fase reversa, la fase estacionaria es polar y la móvil apolar. Las...