Sjakjdkakd

[pic]
Universidad de Chile
Facultad de Ciencias
Departamento de Química
Análisis instrumental II













INFORME DE LABORATORIO Nº 3:
“UNIDAD CROMATOGRAFÍA”




CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA DE ALTA RESOLUCIÓN (HPLC):


“SIMULACIÓN COMPUTACIONAL”

















Nombre: Lucero Paredes R.Carrera: Química ambiental.
Profesora: Sylvia Copaja.
Ayudante: Elisa Villarroel.
Fecha entrega: 22 de Junio del 2007.







INTRODUCCIÓN.





La Cromatografía se ha definido como un método físico de separación en el cual los componentes a separar se distribuyen entre dos fases inmiscibles, una de las cualesconstituye la Fase Estacionaria, de gran área superficial, y la otra es la Fase Móvil, que pasa a través o a lo largo de la fase estacionaria.


La Cromatografía liquida de alta resolución (HPLC), se ha transformado en la técnica cromatográfica más popular y versátil de las técnicas analíticas modernas en los laboratorios actualmente.

Para ayudar a la separación de analitos, seemplean programas computacionales, donde por medio de una simulación de la separación cromatográfica, se puede saber previamente las condiciones para una separación óptima de estas separaciones.

El programa de simulación computacional ocupado en este práctico se llama HPLC, donde dentro de sus opciones está la posibilidad de cambiar la forma de elusión de la fase móvil, la elección dediferentes columnas, detectores, fase móvil, etc. Además de la posibilidad de analizar hasta 3 muestras simultáneamente.




Objetivos:

- Utilizar un programa computacional para analizar las variables que determinan una separación cromatográfica.
- Analizar una muestra problema.






















PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL.

a. Materiales:
- EquipoHPLC (programa de simulación computacional)
- Muestras de compuestos: fenol, benceno, tolueno, anisol, p-nitrofenol.


b. Metodología:
- Examinar el programa de simulación, explorando todas las opciones existentes, determinando cada variable involucrada.
- Analizar lo mejor posible, mediante la mejor separación de acuerdo a la correcta elección de cada variable para lamezcla: Fenol-Benceno-Tolueno.
- Analizar una muestra problema, indicando las variables elegidas.
- Realizar una óptima separación de la muestra problema en elusión isocrática y elusión en gradiente.
- Fundamentar la separación de la muestra (cada analito), considerando resolución, eficiencia de la columna y el tiempo de análisis.



RESULTADOS Y DISCUSIONES.

1- Descripción delprograma:
El programa de simulación, tiene diferentes variables, tales como:
- Solventes: (fase móvil), que pueden ser (además del agua), metanol, acetonitrilo, y tetrahidrofurano, cada uno de ellos se usa de acuerdo a la semejanza de polaridad con la muestra, así para un compuesto que no es tan polar, se usa metanol:agua.
- Columnas: (fase estacionaria), este programacomputacional trabaja con fase inversa, lo que indica que la columna es apolar, dentro de las que trae el programa, se encuentran C-8 y C-18, de diferentes marcas, de diferente longitud y tamaño de la partícula de relleno.
- Detector: el programa entrega dos posibilidades de detectores, uno de longitud de onda variable y otro de UV-VIS con arreglo de diodos. Este último tiene mas aplicaciones, ya queademás de detectar los analitos, entrega los espectros UV, que hacen posible la determinación de cada señal, que muchas veces es desconocida.
- Control panel: en esta opción se encuentran variables como la velocidad de flujo de la fase móvil, la alícuota inyectada, la forma de elusión de la fase móvil (isocrático o en gradiente).
- Muestras: en esta opción, se encuentran todas los...