Soluciones

SOLUCIONES PATRON Y CONTROL PARA LA MEDICION DE LA HEMOGLOBINA COMO OXIHEMOGLOBINA
Eugenia Ma. Quintana*, Mario Chaves* y German F. Sáenz*. RESUMEN Se señala, por primera vez, la preparación de patrones y controles para la determinación de Hb como Hb02, denominándoseles OXI -CIHATA y OXITROL, respectivamente. Se evaluó su estabilidad semana a semana y por un período de 6 meses. Se estudió doshemolizados control, uno con timerosal al 0.01 por ciento y otro con etanediol al 33 por ciento v/v y 4 soluciones patrón: timerosal-EDTA. 4 Na, timerosal-NH 4OH, etanediol-EDTA. 4 Na, y etanediolNH4OH. Después de evaluar la precisión, exactitud y estabilidad, se recomienda emplear como solución 2 control y patrón un hemolizado de Hb0 cuyo preservante sea timerosal al 0.01 por ciento empléandosecomo solución diluente la sal tetrasódica de EDTA al 0.3 por ciento, tanto para la preparación de esas soluciones como para la Hemoglobinometría. [Rev. Cost. Cienc. Méd. 1987; 8(3):149-158]. INTRODUCCION En 1961 Van kampen y Zijlstra (14) proponen un procedimiento para la estandarización de la hemoglobina (Hb), basado en su determinación como cianometa hemoglobina (HiCN), per o no fue sino hasta conla proposición de Cannan (2) en 1965, para el uso de una solución de referencia para HiCN, que se cuenta con un método exacto y preciso. Finalmente, en 1967 el Comité Internacional de Estandarización de Hematología (-ICSH-) (6) recomienda el método de la HiCN y el uso de aquella solución concentrada de HiCN como patrón, ratificándose dicho acuerdo en varias publicaciones (7,8). A pesar de ser unmétodo recomendado por el ICSH, se le han esgrimido algunas críticas, entre las que se mencionan un relativo alto costo, una toxicidad potencial del reactivo utilizado, y el que mida hemoglobina total y no exclusivamente la oxihemoglobina (Hb02). Sin demérito de la bondad
* Centro de Investigación de Hemoglobinas Anormales y Trastornos Afines (CHATA); Cátedra de Hematología, Departamento deAnálisis Clínicos, Facultad de Microbiología, Universidad de Costa Rica, Hospital San Juan de Dios, San José, Costa Rica.

reconocida internacionalmente al método de la HiCN, se puede considerar que la determinación de la Hb como Hb02 sería un procedimiento alternativo de la HiCN y, tal vez electivo, al menos con el fin de obtenerse resultados compati bles con la Hb fisiológicamente activa (9). Ennuestro medio, la experiencia ha sido muy beneficiosa (11,13). Por lo tanto, el presente artículo en nada contradice lo universalmente aceptado y lo investigado en torno a la HicN, sino que intenta ofrecer la factibilidad de contar con una alternativa para la Hemoglobinometría a base de HbO2 alcalina, con las ventajas que ofrece su bajo costo y la inocuidad de los reactivos y, señalar, por primera vez,la preparación de patrones (OXI-CIHATA) y controles (OXITROL) para su normalización y determinación.

MATERIALES Y METODOS En experimentaciones previas a la presente, se ensayó diversos preservantes y diluentes para 2 estudiar la estabilidad de varias soluciones de HbO. Se probaron soluciones a diferentes concentraciones de KCN, timerosal, EDTA, cloruro de benzalconio y etanediol (10), tanto enforma individual como en diferentes combinaciones, con y sin sacarosa (1). Finalmente, por los resultados obtenidos, se descartó las soluciones a base de KCN, de benza lconio y el empleo de sacarosa. Para la nueva experimentación se de talla lo efectuado: se preparó un hemolizado concentrado de HbO2 según Singer (12) a partir de sangre total normal fresca de la siguiente manera: 1. Centrifugar lasangre y eliminar el plasma. 2. Lavar los glóbulos rojos empacados 3 veces con solución salina al 0.85%. 3. Agregar a cada volumen de glóbulos rojos medio volumen de agua destilada. 4. Agitar los tubos y agregar medio volumen de tetracloruro de carbono, mezclando por agitación vigorosa. 5. Centrifugar y obtener el sobrenadante, el cual contendrá una concentración de Hb de unos 18 g/dl. A...