SOUNBLOTCH

. J Virol 2011 abril; 85 (7) : 3229-3238.
. Publicado en línea 26 de enero 2011 doi:  10.1128/JVI.01320-10
PMCID: PMC3067865
La replicación de Avocado SUNBLOTCH Viroid en la levadura Saccharomyces cerevisiae
Clémentine Delan-Forino , Marie-Christine Maurel ,y Claire Torchet*
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Los viroides son los agentes patógenos conocidos más pequeños. Son no codificantes,,, ARN de cadena simple cerrado circulares "desnudos", que se replican a través de la transcripción de ARN-ARN. Los viroides de la Avsunviroidae familia poseen una ribozima cabeza de martillo en su secuencia, lo que permite la libre división durante su replicación. Hasta la fecha, sólo se handetectado viroides en las células vegetales. Este sentido, investigar la replicación de Avocado sunblotch viroide (ASBVd) delAvsunviroidae familia en un huésped no convencional, la levadura Saccharomyces cerevisiae . Se demuestra que las hebras de ARN ASBVd de ambas polaridades son capaces de auto-escindir y para replicarse en una célula eucariota unicelular. Se demuestra que el ARN viroidemonomérica se desestabiliza por el nucleares 3 'y la citoplásmica 5' de ARN vías de degradación. Por primera vez, nuestros resultados proporcionan evidencia de que los viroides se pueden replicar en otros organismos distintos de las plantas y que la levadura contiene todos los elementos celulares esenciales para la replicación de ASBVd.
Los viroides son los más pequeños y los más simples eucariotaspatógenos conocidos ( 12 ). Son ARN circular de cadena sencilla capaces de infectar plantas y el rango 246 a 401 nucleótidos (nt). Sin embargo, algunas variantes de 120 o 475 nt se hace referencia en la base de datos ARN subvirales ( 47 ).A diferencia de los virus, que no codifican para cualquier proteína, que están desprovistos de la cápside o un sobre, y están altamente estructuradas ( 13 , 58 ). Sehan descrito más de 34 especies de viroides, que se dividen en dos familias: la Pospiviroidae y Avsunviroidae . Los viroides de la Pospiviroidae réplica de la familia a través de un mecanismo de círculo rodante ARN en el núcleo, y en los cloroplastos para los miembros de la Avsunviroidae familia. Los viroides se mueven a través de la planta a través del floema y plasmodesmos que son parte delsistema vascular de la planta y se transmiten por medios mecánicos, la reproducción vegetativa, y a través de semillas e insectos ( 14 , 15 , 42 ). Los miembros de laAvsunviroidae familia, tales como aguacate SUNBLOTCH viroide (ASBVd) contienen una ribozima cabeza de martillo catalítica y se replican a través de la siguiente mecanismo ( 20 , 21 , 53 ). El ARN infeccioso circular monomérico, que tiene decadena positiva [(+)] polaridad, se transcribe por una ARN polimerasa del huésped, produciendo hebras negativas oligoméricas que la auto-escindir a través de la ribozima viroide en monómeros y circularizar en cadena negativa [(-) ] viroides circulares. Estas especies de ARN sirven como moldes para formar (+) ARN de polaridad siguiendo los mismos pasos en una manera simétrica. De acuerdo con estemecanismo de replicación, la ribozima se somete a auto-escisión en RNAs de ambas polaridades. Por lo tanto, tanto (+) y (-) ARN circulares monoméricas se acumulan en los tejidos infectados por Avsunviroidae .
En base a estas características, los viroides ancestrales podrían haber estado presentes en un antiguo mundo de ARN ( 11 , 23 ), uno de los principales escenarios de evolución en el que laspropiedades funcionales de los ácidos nucleicos y las proteínas se observan hoy en día serían originalmente han sido realizadas por las moléculas de ARN ancestrales ( 2 , 30 , 37 , 41 ). En este contexto, es interesante para explorar el comportamiento de los viroides y de otros ARN satélite filogenéticamente relacionados en diferentes condiciones ( 19 , 38 ). Por ejemplo, ya hemos estudiado la...