Su Gllq1

',G5+?/(3+(:1:+.+9

!"#$%&'(!"#$"%&!&'
Método GOD-PAP
Prueba enzimática colorimétrica por glucosa
Método con desproteinización

Pipetear en los
tubos de
centrifugación
Muestra
!-*(%

Reactivoenzimático
Reactivo enzimático
Solución desproteinizante
Estándar

Semi-micro
!-*(%

Muestra

!-*(%

100 µl

!
100 µl

50 µl

!
50 µl

!
1000 µl

!(#+"%

)*+,+-./012-(3+4(+,.506+
10260
4 x 100 ml
!"#$%
101211000 ml
10122
1000 ml
10123
9 x 3 ml
!&'(%

Macro
Muestra

!
500 µl

!
!
1000 µl
500 µl
!
!
Mezclar cuidadosamente, centrifugar las muestras a alta velocidad
de 5 a 10 minutos.
Agua destiladaH+.+*?1-/012-

78.939(1
La glucosa se determina después de la oxidación enzimática en
presencia de glucosa oxidasa. El peróxido de hidrógeno formado
reacciona bajo la catálisis de la peroxidasa con fenol y4-aminofenazona produciendo un complejo rojo-violeta usando la quinoneimina
como indicador.

Pipetear en las
cubetas

!-*(% ó
Muestra

Blanco
reactivo

!-*(% ó
Muestra

Blanco
reactivo

!-*(% diluídoo
sobrenadante
Agua destilada.

100 µl

!

50 µl

!

!
2000 µl

100 µl
2000 µl

!
1000 µl

50 µl
1000 µl

)*1-01:19(3+(4/(*+/0012-

Mezclar, incubar por 10 minutos de 20...25°C ó 5 minutos a 37°C.
Leerla absorbancia del !-*(% y la muestra frente al blanco de
reactivo antes de 60 minutos ("A).

!")*%

GOD

Glucosa + O2 + H2O

acido glucónico + H2O2
POD

2 H2O2 + 4-aminofenazona + fenolquinoneimina + 4 H2O2

$9-.+-139,
;(<(=>>(?4(2(=>>>(?4(@+/0.1A9(+-B1?C.109
!")*%
Buffer fosfato (pH 7,5)
0,1 mol/l
4-aminofenazona
0,25 mmol/l
Fenol
0,75 mmol/l
Glucosa oxidasa
> 15 KU/l
Peroxidasa
> 1,5 KU/lMutarotasa
> 2,0 KU/l
Estabilizantes
=>>>(?4(&945012-(3+,:*9.+1-1B/-.+
!(#+"%
Acetato de uranilo
1,6 g/l
Cloruro de sodio
9 g/l
!"#$%,10122: R 20/22-33
D(?4(',.C-3/*
!-*(%
Glucosa
100 mg/dl ó 5,55mmol/l
)*+:/*/012-(3+(49,(*+/0.1A9,
!(#+"% y !")*% están listos para usar. !-*(% se diluye 1+10 con agua
destilada (ver esquema de pipeteo).
',./E1413/3(3+(49,(*+/0.1A9,
Los reactivos son estables hasta...