Sustancias Tampón

TAMPONES
INTRODUCCION
La preparación de tampones constituye una tarea de rutina en un
laboratorio de bioquímica. Su utilización no solo es indispensable en la
manipulación de cualquier enzima,sino que todas aquellas técnicas,
analíticas o preparativas, para la separación de moléculas biológicas
capaces de ionizarse, basadas precisamente en la diferencia de carga
(electroforesis,cromatografía de intercambio iónico) de las distintas
moléculas implican la utilización de tampones adecuados que permitan
una ionización diferenciada de las moléculas y, por tanto, su
separación.
Esimprescindible, en consecuencia, familiarizarse con la
preparación y características de los tampones. ¿Cómo preparar un
tampón adecuado?, ¿Cuál es la zona útil de un tampón?, ¿Cuál es la
capacidad de untampón?, y, en definitiva ¿Cómo debe prepararse un
tampón? Son cuestiones que debemos tener absolutamente claras.
En esta práctica realizaremos una serie de experimentos que
además de pretenderresolver las cuestiones señaladas previamente nos
permitan visualizar el efecto de tamponación.
(En caso de necesidad conviene repasar los conceptos teóricos
relacionados: pH, pKa, disociación deácidos y bases débiles, etc.).
PREPARACION DE UN TAMPON
Los tampones son, como sabemos, mezcla de ácidos o bases
débiles con sus sales, y su zona de utilidad como tales depende
lógicamente del valorde su pKa. Este es pues un factor limitante a la
hora de seleccionar un tampón. Pero además hay que tener en cuenta,
por ejemplo, si alguno de los componentes del tampón puede interferir
con lareacción o el proceso a realizar. Este dato no siempre tendremos
la posibilidad de conocerlo a priori y puede ser necesario ensayar
varios tampones de similar pKa.
Por otra parte hemos de tener encuenta cuales van a ser los
cambios previsibles de la concentración de iones hidrógeno durante el
proceso, con el fin de que el tampón que preparemos tenga una

capacidad adecuada para amortiguar...