Técnicas Para La Detección De Apoptosis y Senescencia Celular

ARTÍCULO DE REVISIÓN

Técnicas para la detección de apoptosis y senescencia celular in vitro y su importancia en biotecnología de la salud
Techniques for detecting in vitro apoptosis and cell senescence and their importance in health biotechnology
Mauricio Martínez Salazar1

Resumen Se presenta una revisión bibliográfica sobre las principales técnicas de detección de los niveles deapoptosis y senescencia celular para aplicación en cultivo de células animales y humanas, dada la importancia de establecer la metodología más adecuada para su implementación en investigación biológica y biomédica que usa este tipo de células como medios de diagnóstico, experimentación y obtención de alternativas terapéuticas. Existe la necesidad de aplicar técnicas estandarizadas para evaluación ymonitoreo del cultivo de células ya que esto garantiza la calidad del mismo cuando este tiene aplicación en el campo clínico. La apoptosis y la senescencia celular se perfilan como parámetros biológicos idóneos para esta valoración. La apoptosis se considera una forma de muerte celular que, a diferencia de la necrosis, es ordenada, programada y dependiente de energía, que implica la activación de ungrupo de enzimas proteolíticas denominadas caspasas y una cascada molecular intracelular hasta la desaparición completa de la célula. La senescencia celular se define como la pérdida irreversible de la capacidad proliferativa de la célula que al mismo tiempo se encuentra en un estado metabólicamente activo. Se muestra una comparación entre las técnicas de detección de estos fenómenos y, finalmente,se enfatiza en la opción de implementar multiensayos para una determinación más sensible y rigurosa de apoptosis y senescencia celular in vitro. Palabras clave: apoptosis, senescencia celular, detección de apoptosis in vitro, Detección de senescencia celular in vitro.

Abstract This article reviews the main techniques for detecting apoptosis and cell senescence levels for application in animaland human cell cultures, given the importance of establishing the most appropriate methodology for implementing them in biological and biomedical research which uses these kinds of cell for diagnosis, research and in therapeutic alternatives. There is a need for implementing standardised techniques for assessing and monitoring cell cultures as this guarantees culture quality if they can be appliedin the clinical field. Apoptosis and cell senescence appear to be good biological parameters for such evaluation. Apoptosis is considered to be a form of organised and programmed cell death, unlike necrosis; this process is energy1 Biólogo, Investigador Laboratorio de Biomiméticos, Área de Biotecnología de la Salud, Instituto de Biotecnología de la Universidad Nacional de Colombia (IBUN), Bogotá,Colombia. maumartinezs@unal.edu.co

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dependent, implying the activation of proteolytic enzymes called caspases and an intracellular molecular cascade until a cell completely disappears. Cell senescence is defined as being the irreversible loss of a cell’s proliferative capacity whilst still metabolically active. This analysiscontrasts techniques for detecting such phenomenon and emphasises the possibility of implementing multi-assays for a more sensitive and rigorous determination of in vitro apoptosis and cell senescence. Key words: apoptosis, cell senescence, in vitro apoptosis detection, in vitro cell senescence detection.

Recibido: agosto 11 de 2009

Aprobado: noviembre 12 de 2009

Introducción
El cultivode células animales y humanas in vitro es una de las técnicas más empleadas actualmente en investigación biológica y biomédica, ya que constituye un modelo experimental eficaz si se realiza bajo estándares de calidad y aplicando la rigurosidad del método científico. Esta técnica permite llevar a cabo una amplia gama de investigaciones a nivel tisular, celular, bioquímico y molecular, extendiendo...