Técnicas Histoógicas y Microscopio

Técnicas histológicas.
Definición
Las técnicas histológicas son una serie de pasos a través de los cuales una muestra de tejido llega a transformarse en delgados cortes coloreados capaces de ser observados y estudiados en el microscopio.
Sinopsis general
Obtención - Proveer el material para su estudio al microscopio
Fijación - Preservar el material
Inclusión - Humedecer el material en unmedio fácil de cortar en fetas muy delgadas
Corte - Lograr láminas muy delgadas que sean atravesadas por la luz
Coloración - Visualizar los tejidos
Montaje - Preservar el corte, manteniéndolo aislado del aire y deshidratado.

1) OBTENCIÓN:
El material a utilizar puede ser extraído de los diversos animales de laboratorio, o bien puede tratarse de material humano La obtención consiste en laprovisión del material que se desea estudiar por medio del microscopio. El método seleccionado debe ser el adecuado para cada tipo de material. El material humano puede obtenerse a partir de: necropsias (son las piezas que se obtienen de un cadáver, deben ser inmediatamente congelado o fijado para evitar fenómenos de autodestrucción), las biopsias (trozos de tejido que se obtienen de un sujeto convida, a partir de las cuales se obtiene un diagnostico patológico existen varios tipos de biopsias: w-biopsia incisional: se realiza seccionando con instrumentos cortantes como el bisturí. w- biopsia por punch: el punch es un instrumento filoso con forma de sacabocados que se utiliza para tomar biopsias de piel. .w-biopsia por punción: se realiza con agujas es del tipo intramuscular(microbiopsia).w- biopsia endoscopia: se hace a través de endoscopios,) y las piezas operadas (tejidos que han sido extraídos de las intervenciones quirúrgicas, generalmente tumores u órganos inflamados)w citologia exfoliatica: obtención de células de la piel

2) FIJACIÓN:
La fijación tiene por objeto matar las células y tratar de conservarlas en el estado en que se encontraban durante la vida. Con lafijación se trata de conservar la estructura morfológica y química de las células y tejidos que tenían en el estado vivo estabilizando las proteínas y creando enlaces cruzados ( se utiliza fijador de glutaraldehido o formaldehído) y evitar un mínimo de modificaciones es por eso que se debe realizar inmediatamente luego de extraer las células del organismo. La fijación debe penetrar con extremadarapidez, además la ésta facilita la realización posterior de procedimientos de coloración o de identificación para el conocimiento de su constitución íntima y evita la multiplicación microbiana y procesos de autólisis donde la célula cambia su ph activando enzimas que degradan a la célula . La elección del fijador va a estar determinada por el tipo de investigación histológica que se pretendarealizar. Muchos de ellos varían en su composición, naturaleza y la forma en que reaccionan con las células. Fijadores químicos: Son los más utilizados; pueden ser fijadores simples, constituidos por una sola sustancia química, y fijadores compuestos o mezclas fijadoras cuando varias sustancias intervienen en su constitución. FIJADORES SIMPLES: Formol al 10%, es el más usado. Su empleo es aconsejableen todos los casos en que no se disponga de un fijador especial, principalmente cuando se trata de fijar órganos o tejidos para estudios histológicos topográficos. FIJADORES COMPUESTOS: En su composición intervienen un número variable de fijadores simples racionalmente elegidos con el fin de completar la acción de cada uno de ellos o atenuar sus defectos. Fijadores físicos: 1. Desecación. 2. Calor(desnaturaliza la estructura proteica, por lo cual casi no se lo emplea).3 4. Frío. 5. Congelación (preservan la composición química) y desecación. (evapora el agua de los tejidos) PARA LA FIJACIÓN DE UNA MUESTRA ACORDE NO DEBE SUPERAR L TAMAÑO DE 1CM DE LADO.
Es importante recordar:
- En caso de no saber cual es el fijador ideal para una determinada muestra de tejido, debe utilizarse formol....