Técnicas para el estudio de la histología

 Difracción de rayos x: Es un paso adicional en la dirección a la resolución de detalles cada vez más pequeñas mediante la aplicación de rayos de longitud de onda más corta. El principio se basa en enviar un estrecho haz de rayos x a través de la muestra que se desea analizar. El haz se separa y se dispersa en un patrón de difracción que se registra en una película fotográfica ubicada pordebajo de la muestra. Solo es posible utilizar este método en la investigación de estructuras muy ordenadas de naturaleza cristalina o semicristalina.
 Microscopio de luz ultravioleta: Con el empleo de la luz ultravioleta con longitud de onda de alrededor de 250 nanómetros (casi la mitad de la luz visible que se utiliza en el microscopio óptico), al principio es posible duplicar el poder deresolución. El sistema óptico de este microscopio suele estar construido de cuarzo, que permite el paso de la luz ultravioleta que es invisible, la principal importancia de este microscopio es que los ácidos (ADN, ARN) nucleícos absorben la luz ultravioleta (260 nanómetros) por lo que se pueden detectar con facilidad.
 Técnica inmunocitoquímica e inmunohistoquimica: determinadas células de organismossuperiores tienen la capacidad de responder ante sustancias extrañas (antígenos), sintetizando otros compuestos llamados anticuerpos, la técnica se basa en el reconocimiento del antígeno por anticuerpo que previamente se ha conjugado con el fluorocromo, una enzima o un coloide de un metal pesado (por ejemplo el oro). Al conjugarse con estos compuestos, los anticuerpos pueden reconocer en el tejidoo en la célula los componentes antígenos contra los cual fueron desarrollado, poniendo así de manifiesto la localización o presencia de aquellas estructuras, objetos del estudio mediante reacciones químicas o a través de microscopios especializados (fluorescencia o electrónico).
 Centrifugación diferencial o dinámica: Este método es utilizado para la separación de organelos celulares. Antes dela centrifugación se efectúa una homogenización se coloca pequeños pedazos de tejido en una solución adecuada (por ejemplo de sacarosa)que contribuye a mantener intactos los organelos y se opone a su tendencia a agruparse. Después se coloca la solución con los trozos de tejido en un homogenizador, que puede tener la forma de un cilindro de vidrio el cual rota a gran velocidad de una varilla deteflón. Los tozos de tejido son aplastados por la fricción, así se rompen las membranas celulares y quedan libres en solución los organelos y las inclusiones. Después de uno minutos de reposo se centrifuga l sobrenadante con velocidad moderada y temperatura apenas superior a 0°. Después de la sedimentación de las partículas más pesadas se puede hacer sedimentarlas partículas con mayor grasa mediantecentrifugaciones con velocidad crecientes.
 Centrifugación por gradientes de densidad (centrifugación equilibrada). Con este método es posible obtener mayor cantidad de fracciones mas limpias. Se obtiene el homogenizado como en el caso anterior y se agrega una solución de, por ejemplo sacarosa, que contiene concentraciones crecientes de sacarosa a medida que se acerca al fondo (con densidadcreciente) a medida que se acerca al fondo (con densidad creciente). La centrifugación prolongada a gran velocidad hacen que las partículas sedimenten en el sitio que les permite su densidad (se detiene cuando alcanza una profundidad equivalente a su propia densidad). Se logra obtener fracciones casi puras de núcleos, elementos nucleares, mitocondrias, lisosomas, ribosomas, retículo endoplasmico ygránulos de secreción. Esto por ejemplo a ayudado al conocimiento respecto a la replicación y a la transcripción del DNA y la síntesis de proteínas.
 Método de congelación y fractura: Se aplica a la investigación de tejidos por microscopia electrónica. Consiste en congelar rápidamente el tejido en nitrógeno liquido y luego colocarlo en vacio, para después fracturarlo con un cuchillo o navaja (de...