TÉCNICAS RÁPIDAS DE DETECCIÓN DE ANTÍGENO

TÉCNICAS RÁPIDAS DE DETECCIÓN DE ANTÍGENO
INTRODUCCIÓN
Las técnicas inmunológicas de detección de antígenos nos permiten detectar la presencia de microorganismos o de fragmentos de los mismos en las muestras clínicas.
El desarrollo de estas técnicas se inició con el propósito de poder acelerar el diagnóstico de las enfermedades infecciosas tratando de superar algunos de los inconvenientes,especialmente la lentitud, de las técnicas convencionales.
Qué duda cabe que disponer de resultados rápidos es de utilidad para el manejo clínico y terapéutico de los pacientes.
Son técnicas especialmente útiles en aquellos casos en que el microorganismo causal crece lentamente o bien, no crece en los medios de cultivo. Además, los resultados de los mismos no se ven alterados por la administraciónprevia de antimicrobianos.
Como inconvenientes principales de las mismas cabe destacar que no ofrecen información sobre la sensibilidad del microorganismo detectado a los antimicrobianos, y que en algunos casos no han alcanzado los niveles de sensibilidad y especificidad deseados.
FUNDAMENTO
Las técnicas de detección de antígeno son técnicas inmunológicas que se fundamentan en la afinidadantígeno-anticuerpo.
Definiríamos el antígeno como aquella molécula estructural o metabólica de origen microbiano que es reconocida como extraía por el organismo humano y que es capaz de desencadenar una respuesta inmunitaria.
Por otro lado, un anticuerpo es una gammaglobulina sintetizada por las células plasmáticas en respuesta a la estimulación ejercida por un antígeno, con el que reacciona deforma específica, gracias a la correspondencia entre sus estructuras. De forma que si disponemos de anticuerpos específicos podemos detectar los antígenos correspondientes en una muestra clínica.
Esta es la base de las técnicas de detección de antígenos microbianos.
Los anticuerpos específicos empleados en estas técnicas son obtenidos como antisueros de animales inmunizados, que serían anticuerpospolicrómales, o por producción in vitro mediante hibrido más con la obtención de anticuerpos monoclonales.
Los anticuerpos monoclonales pueden utilizarse solos o combinando diferentes anticuerpos dirigidos contra dos o más epítropes diferentes.
La principal ventaja de los anticuerpos monoclonales es su alto grado de especificidad, lo cual los hace extremadamente útiles para distinguir entremicroorganismos muy próximos antigénicamente.
Sus limitaciones incluyen, por lo tanto, una incapacidad de detectar todas las variedades de un mismo microorganismo debido a su alta especificidad y una te Úrica baja afinidad
PRINCIPALES TÉCNICAS DE DETECCIÓN DE ANTÍGENO
A pesar de que el fundamento de todas estas técnicas requiere de la utilización de un anticuerpo específico, las técnicas existentesse diferencian en función del soporte en que tiene lugar la reacción y en la forma de revelar la presencia de este antígeno.
A nivel estructural los anticuerpos presentan dos extremos iguales que son los que se unen específicamente al antígeno, es decir cada anticuerpo puede unirse a dos moléculas de antígeno (fragmentos Fab: fragment antigen binding), y un extremo diferente con propiedadesbiológicas relacionadas con la activación del sistema de complemento y con la fagocitosis (fragmento Fc: llamado así porque cristaliza con facilidad).
El revelado de la presencia del antígeno se realiza mediante anticuerpos conjugados. Los anticuerpos a través del fragmento Fc pueden ser fijados a partículas (moléculas de oro coloidal, partículas de látex, etc.) y también pueden unirse químicamentea enzimas, moléculas fluorescentes, radioactivas o lumínicas.
Las principales técnicas de detección de antígenos son:
a) contrainmunoelectroforesis,
b) técnicas de aglutinación,
c) inmunocromatografÌa,
d) enzimoinmunoanálisis,
e) inmunofluorescencia
f) métodos luminométricos.
Seguidamente se describen los fundamentos de estos métodos.
Contrainmunoelectroforesis.- En un par de pocillos...