Taller 1 Bacteria

UNIVERSIDAD DE LOS ANDES
BIOQUIMICA GENERAL LABORATORIO
TALLER REPASO PARCIAL 1
Se ha reportado que el mosquito Anopheles albimanus (Diptera: Culicidae) es un vector de Plasmodium falciparum(agente causal de malaria) en diferentes regiones tropicales del mundo. Por otra parte, una posible solución para reducir la transmisión de esta enfermedad es control biológico. El principio de dichocontrol es utilizar un organismo para que limite el crecimiento poblacional de otro. De este modo, se ha propuesto utilizar la bacteria Lysinibacillus sphaericus como agente de control dado que tiene lacapacidad de producir una serie de toxinas de origen proteíco entre las que se encuentra Mtx-1. Esta toxina es capaz de causar mortalidad a las larvas de mosquito una vez que estos la ingieren.Usted hace parte de un laboratorio de microbiología en donde tienen varias cepas de L. sphaericus y se le pidió que analice cuáles cepas serían buenas candidatas para controlar las larvas de A.albimanus. Para cuantificar la producción de toxinas, se utilizan dos métodos colorimétricos: α y β, además de un método cualitativo (electroforesis) para confirmar la presencia de esta proteína.
Para poderanalizar las muestras con los métodos cuantitativos se realizó la siguiente fase preparativa a 2 mL de toxina purificada:
-Para α, se tomaron 5ul de toxina Mtx-1 y se aforaron a 0,007 mL con aguadestilada. Luego se mezclaron 2 uL de la preparación anterior con 8x10-5 dL de solución.
-Para β, se tomaron 10 uL y se mezclaron con 0,040 mL de agua destilada. Esta preparación se llevóposteriormente a un volumen de 0.000055L.
A continuación se tienen las curvas de calibración obtenidas de los dos métodos α y β:
Método α Método β
[ ] mg/L ABS FACTOR [ ] mg/dL ABS FACTOR
600 2.36   600 1  550 2.34   550 1.1  
500 2.35   500 1.3  
400 2.34   400 0.9  
320 1.85   320 0.81  
200 1.2   230 0.6  
160 0.97   160 0.43  
100 0.68   100 0.27  
80 0.54   80 0.72  
50 0.36   50 0.13  ...