Taller De Conservacion I

CALCULOS Y CONSULTAS
 Grafique la curva de calibración (Concentración vs Absorbancia) para la determinación de azúcares reductores con el método del DNS. Muestre todos los resultados obtenidos. Calcule el valor de R2.





 Calcule la concentración en azúcares reductores (Glucosa) de la muestra problema.

 Consulte otros métodos utilizados para la determinación de azúcaresreductores y glucosa. ¿Qué ventajas y desventajas presentan para su uso en biotecnología?.

1. MÉTODO AUTOMÁTICO DEL ÁCIDO CÚPRICO
Consiste en la extracción de azucares de la muestra con etanol, luego este se evapora, seguidamente el residuo se disuelve en agua; los azucares en solución reaccionan con picrato formando picramida la cual se mide colorimétricamente. En caso de tratarse de sacarosa estadebe ser previamente tratada con invertasa dializándola.
Ventajas:
 Puede aplicarse incluso a muestras que contengan solo lactosa.
 Puede medir otros azucares que estén presentes, además de glucosa, fructosa.
Desventajas:
 Las concentraciones de glucosa y/o fructosa y sacarosa presentes en la muestra deben ser menores al 10%.

2. METODO REDUCTOMETRICO DE LUFF-SCHOORL (antes de lainversión)
Los azucares presentes en la muestra se hacen reaccionar con una solución carbonatada alcalina de concentración conocida de iones cobre (II) calentando a ebullición. El azúcar directamente reductor se oxida y los iones Cu2++ se reducirán a Cu+ que precipitaran como Cu2O. El exceso de Cu2++ se determina yodometricamente.
Ventajas:
 Al emplearse una ebullición de 10 minutos, la acciónreductora de la glucosa y de la fructosa es por lo general igual en este espacio de tiempo permitiendo la elaboración de ambas.
 No requiere una titulación de la solución de la titulación en ebullición como en Lane-Eynon.
Desventajas:
 La reacción de los azúcares y la disolución de Luff no es estequiométrica, siendo necesario un control exacto de las condiciones de trabajo (temperatura deebullición para lograr una fiabilidad y repetibilidad)
 En la reacción pueden interferir otras sustancias acompañadas que disminuirán la capacidad reductora de la disolución.
 Debido a que el reactivo es menos alcalino que en Fehling, se trata entonces de una oxidante más débil requiriendo un mayor tiempo de ebullición.

3. METODO DE MUNSON Y WALKER
Es un método gravimétrico que se basa enel metdo de fehling-sohleth. Se fundamente en la precipitación del oxido cuproso en presencia de una sustancia reductora. El contenido de cobre es proporcional al azúcar presente y se puede calcular según la tabla de Hammond AOC 52.019/84 (1)
Ventajas:
 Es cuantificable, además de ser cualitativo,
 Es relativamente sencillo y rápido.
Desventajas:
 es necesario precipitar el exceso deacetato neutro de plomo que se forma por la reacción, con oxalato alcalino o sulfato y separar por filtración, ya que interviene en la determinación del azúcar.
 Se tiene que pesar rápidamente los miligramos de oxido obtenidos puesto que el oxido cúprico es higroscópico.
 Se tiene que trabaja en condiciones estrictamente controladas.

4. METODO LANE-EYNON
Este es un método volumétrico, y aligual que el anterior se fundamenta en la reacción de fehling. La solución inicialmente azul por la presencia del complejo de cobre se empalidece al precipitar el oxido y en el punto final debe quedar completamente incolora.
Para la titulación se utiliza como indicador del punto final el azul de metileno el cual es intensamente azul en su forma oxidada e incolora en su forma reducida. Conociendola cantidad de reactivo de Fehling, es decir su titulo analítico, se puede conocer el contenido de azúcar presente en una muestra, por comparación de la misma parte alícuota del reactivo.
Ventajas:
 Pueden obtenerse resultados más precisos que en los gravimétricos, es también rápido y no se necesita de muchas diluciones y poca muestra.
Desventajas:
 La volumetría siempre implica un poco se...