taller de genetica

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TALLER DE GENÉTICA 2

EL ESTUDIO DE
LOS CROMOSOMAS HUMANOS

GUÍA DE ACTIVIDADES
2012

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Material de lectura
LOS CROMOSOMAS Y EL CARIOTIPO
Los cromosomas son las estructuras en que se organiza la cromatina nuclear y que
tienen una expresión dinámica en las distintas fases del ciclo celular. En la mitosis estas
estructuras comienzan un proceso de compactación que alcanza sumáximo nivel en la
metafase. Los cromosomas se tiñen fácilmente cuando están condensados y pueden ser
individualizados con el microscopio óptico. Cada cromosoma contiene una molécula de
ADN lineal asociado a distintas proteínas y el contenido de genes es variable aunque
está en relación con su tamaño. Por eso, cualquier alteración en el número o la
estructura de los cromosomas puede ser causa deenfermedades. Para la detección de
estas alteraciones se desarrollaron numerosas técnicas y todas ellas requieren de un
observador entrenado que las interprete. La citogenética es la rama de la biología que se
encarga del estudio de los cromosomas y sus anomalías.
Los humanos tenemos un número total de 46 cromosomas y este número varía según las
especies. Los 46 cromosomas están constituidospor 23 pares de homólogos y cada
miembro del par proviene de un progenitor. El cariotipo es la constitución
cromosómica de un individuo y es un estudio de rutina en genética médica. Los
cariotipos se pueden informar presentando todos los pares cromosómicos ordenados de
acuerdo a su tamaño, que en un principio eran recortados de la fotografía de una
metafase, y ahora se pueden hacer conanalizadores automáticos. De los 23 pares, el par
de cromosomas sexuales se señala por separado para indicar el sexo del individuo. Para
citar el cariotipo de un individuo se indica primero el número total de cromosomas y
seguidamente los componentes del par sexual precedido de una coma. Así, el cariotipo
normal de un varón se escribe 46,XY y el de una mujer 46,XX. Las anomalías
cromosómicas son unacausa más importante de abortos espontáneos, retardo mental y
malformaciones.
EL CULTIVO CELULAR Y EL PROCESAMIENTO DEL MATERIAL
Para el estudio cromosómico se debe realizar el cultivo un tejido del individuo donde
las células crezcan y se dividan rápidamente. El tejido más accesible para ese fin es la
sangre y las células que crecen son los linfocitos. La técnica comienza con la toma de
unamuestra de sangre periférica por venopuntura con heparina como anticoagulante.
Se siembran alrededor de 10 gotas en un medio enriquecido y se incuba a 37ºC durante
72 horas. La estimulación de la división celular se logra con la adición de un factor
mitogénico como es la fitohemaglutinina. Pasado ese tiempo, se agrega una solución
de colchicina al medio para detener la división celular yevitar que las células
completen la mitosis. La colchicina actúa inhibiendo la formación del huso mitótico y
las células que alcanzan la metafase se acumulan en el cultivo. Luego se agrega una
solución hipotónica que hace que las células se hinchen y se las hace estallar con una
técnica de goteo sobre un portaobjeto y los cromosomas se liberan. Posteriormente el
material se fija y se tiñen deacuerdo a las diferentes técnicas.
EL BANDEO CROMOSÓMICO
Con la técnica convencional de tinción con Giemsa los cromosomas se tiñen
intensamente y en forma homogénea y se los puede contar y agrupar por su aspecto
general y eso era lo único que se podía hacer en los primeros cariotipos. La
identificación de cada cromosoma vino posteriormente con las técnicas de bandeo. Estas
técnicas que generanbandas transversales permiten definir a cada cromosoma y estudiar
su estructura. Cada cromosoma tiene del patrón de bandas característico y existen varias

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técnicas de tinción con fines específicos (Tabla I). El bandeo G es el más utilizado en
citogenética clínica.
El bandeo G se logra con un tratamiento controlado con tripsina antes de la coloración
con Giemsa y produce bandas claras...